[發明專利]金葉絲蘭的組織培養方法無效
| 申請號: | 200910049971.4 | 申請日: | 2009-04-24 |
| 公開(公告)號: | CN101869063A | 公開(公告)日: | 2010-10-27 |
| 發明(設計)人: | 陳建華;黃建榮;沈勤 | 申請(專利權)人: | 上海上房園林植物研究所 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 上海科盛知識產權代理有限公司 31225 | 代理人: | 林君如 |
| 地址: | 201114*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 金葉 絲蘭 組織培養 方法 | ||
1.金葉絲蘭的組織培養方法,其特征在于,該方法包括以下步驟:
(1)無菌材料的獲得
取萌發的幼嫩的芽,去除外面包裹的葉片后,用自來水沖洗1-3h后于超凈工作臺上,依次利用質量濃度為70-75%的乙醇浸泡10-50s,體積濃度為0.5-2‰的汞浸泡10-30min,再用無菌水沖洗4-6次,利用無菌濾紙吸干芽表面的水分后,將芽切成0.5-2cm長的帶芽的節段,節段接種于芽誘導培養基上;
(2)芽的分化和增殖
節段接種于芽誘導培養基上2-4周后,芽部位開始膨大,出現黃綠色突起,3-5周后可見芽分生組織,再培養1-2個月,芽可以長到1-3cm,將不定芽切下轉入不定芽增殖培養基中進行增殖培養,芽的基部雖有較多愈傷組織,但不影響不定芽的增殖,不定芽生長迅速且無玻璃化等不良現象,在培養基中生長發育良好;
(3)不定芽壯苗培養
在不定芽增殖培養基上,誘導出的叢生芽中每叢有2-3株能夠伸長,其余的處于矮化狀態,將叢生芽分成小叢后,轉至壯苗培養基上生長,不定芽迅速伸長,20-40天后可以長至1.5-3cm;
(4)生根培養
取1.5-3cm的不定芽小植株,轉接入生根培養基中誘導生根,5-15天后幼苗基部分化出白色的根原基,25-35天后可以長至2-3cm,根系粗壯,須根眾多,生根率為90-100%;
(5)煉苗與移栽
生根培養20-30天,根系長至1-2cm時,選擇根系發達、生長健壯的無菌苗,于室內開瓶煉苗1-3天,然后將苗取出,洗凈根部的瓊脂,栽于溫室內的苗床中馴化20-40天,即可移栽室外,給予肥水管理,最終的移栽成活率為90-100%。
2.根據權利要求1所述的金葉絲蘭的組織培養方法,其特征在于,所述的芽誘導培養基包括MS+6-BA1.0-3.0mg/L+NAA0.1-0.3mg/L。
3.根據權利要求2所述的金葉絲蘭的組織培養方法,其特征在于,所述的芽誘導培養基優選MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。
4.根據權利要求1所述的金葉絲蘭的組織培養方法,其特征在于,所述的不定芽增殖培養基包括MS+6-BA0.5-2.0mg/L+NAA0.1-0.2mg/L。
5.根據權利要求4所述的金葉絲蘭的組織培養方法,其特征在于,所述的不定芽增殖培養基優選MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。
6.根據權利要求1所述的金葉絲蘭的組織培養方法,其特征在于,所述的壯苗培養基包括MS+6-BA0.5-2.0mg/L+NAA0.1-0.2mg/L。
7.根據權利要求6所述的金葉絲蘭的組織培養方法,其特征在于,所述的壯苗培養基優選MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。
8.根據權利要求1所述的金葉絲蘭的組織培養方法,其特征在于,所述的生根培養基包括MS+NAA0.05-0.2mg/L。
9.根據權利要求8所述的金葉絲蘭的組織培養方法,其特征在于,所述的生根培養基優選MS+NAA0.1mg/L。
10.根據權利要求2或4或6或8所述的金葉絲蘭的組織培養方法,其特征在于,所述的培養基還包括蔗糖20-40g/L、瓊脂粉4-8g/L,培養基pH5.5-6.0,培養溫度24-26℃,光照1500-2500lx。
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