[發(fā)明專利]三碘甲腺原氨酸的檢測試劑盒及其使用方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910049308.4
• 申請日: 2009-04-14
• 公開（公告）號: CN101865917A
• 公開（公告）日: 2010-10-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張偉;王海蛟;趙衛(wèi)國
• 申請（專利權(quán)）人: 博陽生物科技(上海)有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/542
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所 31219
• 代理人: 許亦琳;魏秀莉

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及三碘甲腺原氨酸的檢測試劑盒，具體涉及基于光激化學(xué)發(fā)光原理的三碘甲腺原氨酸的檢測試劑盒及其使用方法。

背景技術(shù)

甲狀腺疾病是一組較常見的內(nèi)分泌疾病，包括缺碘性甲狀腺腫、其他原因引起的甲狀腺腫、甲亢、甲狀腺瘤、甲狀腺炎、甲狀腺功能減退等。甲狀腺病的發(fā)生率比較高。

甲亢也就是甲狀腺功能亢進癥，它是一種臨床上十分常見的內(nèi)分泌疾病。是指由各種原因?qū)е录谞钕俟δ茉鰪?，甲狀腺激素分泌過多或因甲腺原氨酸(T3、T4)在血液中水平增高所導(dǎo)致的機體神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)心血管系統(tǒng)等多系統(tǒng)的一系列高代謝癥候群以及高興奮癥狀和眼部癥狀。

甲狀腺機能減退癥系甲狀腺激素TSH合成與分泌不足，或甲狀腺激素生理效應(yīng)不好、生物效應(yīng)不足而致的全身性疾病。臨床上可分為呆小病、幼年甲低、成人甲低。若功能減退始于胎兒或新生兒期，稱為克汀??；始于性發(fā)育前兒童稱幼年型甲減；始于成人稱成年型甲減。

甲狀腺瘤是臨床常見病，其中絕大多數(shù)為良性病變，少數(shù)為癌，肉瘤、惡性淋巴瘤等。該病女性發(fā)病率明顯高于男性，男女發(fā)病比例約1∶2～3。

甲狀腺炎是以炎癥為主要表現(xiàn)的甲狀腺疾病，包括感染性和非感染性。不少見。臨床權(quán)威上所說的急性、亞急性及已經(jīng)慢性甲狀腺炎，只表明青年疾病過程的長短，它們之間無內(nèi)在聯(lián)系，也不互相轉(zhuǎn)變，每種具有發(fā)表不同的病因、有著臨床特點、病理過程及固有的結(jié)局。

三碘甲腺原氨酸(T3)是從甲狀腺分泌出來的激素，與甲狀腺素共同在甲狀腺球蛋白分子中合成。血液中的T3絕大部分與甲狀腺素結(jié)合球蛋白(thyroxine-binding?globulin，TBG)結(jié)合，約0.4％的游離T3作用于靶細胞，維持正常的生理功能。測定血清中游離三碘原氨酸(T3)的水平可用于甲狀腺疾病的輔助診斷及相關(guān)病人治療效果的監(jiān)測。

免疫學(xué)檢測是基于抗原和抗體的特異性反應(yīng)進行檢測的一種手段，由于其可以利用同位素、酶、化學(xué)發(fā)光物質(zhì)等對被檢測信號進行放大和顯示，因此常被用于檢測蛋白質(zhì)，激素等微量生物活性物質(zhì)。

我國免疫學(xué)檢測基本經(jīng)歷了放射免疫檢測(興起于20世紀70年代，現(xiàn)仍普遍使用于縣級以上醫(yī)院)；酶聯(lián)免疫檢測(興起于20世紀80年代，各臨床機構(gòu)普遍使用)；以化學(xué)發(fā)光為代表的光生物學(xué)標記及免疫檢測技術(shù)(20世紀90年代開始推廣使用，產(chǎn)品步入成長期)三個階段。這一衍變過程主要是基于對檢測方法的敏感性、準確性、以及操作簡捷性的需求的不斷提高而決定的。

化學(xué)發(fā)光免疫分析(Chemiluminescence?Immunoassay)是近十年來在世界范圍內(nèi)發(fā)展非常迅速的非放射性免疫分析技術(shù)。檢測原理是以發(fā)光物質(zhì)作為信號放大系統(tǒng)并籍助其發(fā)光強度直接測定免疫結(jié)合。由于其高靈敏度，檢測范圍寬等優(yōu)點，已成為放射性免疫分析與普通酶免疫分析的取代者，是免疫學(xué)檢測重要的發(fā)展方向。

但目前國內(nèi)自行研制的化學(xué)發(fā)光檢測試劑，大多為非均相反應(yīng)，采用化學(xué)底物直接標記，通過化學(xué)反應(yīng)激發(fā)。其分析過程與傳統(tǒng)酶標檢測類似，需反復(fù)清洗與分離，檢測耗時長，自動化程度不高。國外廠家檢測試劑隨發(fā)光基質(zhì)與檢測形式而各不相同。以Abbott，Bayer與Chiron等公司為代表的化學(xué)激發(fā)，即以化學(xué)發(fā)光底物直接標記抗原或抗體進行免疫測定。最常用的為吖啶酯，在堿性環(huán)境中可被過氧化氫氧化而發(fā)光。BD則以AKP，金鋼脘為基質(zhì)采用酶促化學(xué)發(fā)光。Roche為則采用電化學(xué)發(fā)光(electrochemiluminescence，ECL)，發(fā)光底物二價的三聯(lián)吡啶釕及反應(yīng)參與物三丙胺在電極表面失去電子而被氧化。氧化的三丙胺失去一個H+而成為強還原劑，將氧化型的三價釕還原為激發(fā)態(tài)的二價釕，隨即釋放光子而恢復(fù)為基態(tài)的發(fā)光底物。這一過程在電極表面周而復(fù)始地進行，不斷地發(fā)出光子而常保持底物濃度的恒定。因反應(yīng)過程中牽涉到分離清洗，自動化設(shè)計復(fù)雜，儀器相當昂貴。此外，發(fā)光基質(zhì)的穩(wěn)定性也是一大問題。

光激化學(xué)發(fā)光法通過引入激光技術(shù)與納米微球技術(shù)，成功地解決了上述不足。因反應(yīng)在均相中進行，既加快了反應(yīng)速度，又避免了反復(fù)分離與清洗步驟，能有效降低檢測背景值，減少反應(yīng)時間，并可實現(xiàn)自動化操作。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種可用于定量檢測血清中三碘甲腺原氨酸的檢測試劑盒及其使用方法。

本發(fā)明的技術(shù)原理：