[發明專利]一種三維轉移性肝癌類組織體外模型的構建方法

無效

• 申請號: 200910048099.1
• 申請日: 2009-03-24
• 公開（公告）號: CN101508973A
• 公開（公告）日: 2009-08-19
• 發明（設計）人: 崔杰峰;劉銀坤;唐建華;陳榮新;徐長德;康曉楠;郭坤
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬中山醫院
• 主分類號: C12N5/08
• 分類號: C12N5/08
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司
• 代理人: 翁若瑩

1.一種三維轉移性肝癌類組織體外模型的構建方法，其特征在于，具體步驟為：

第一步：將DMEM/F12培養液、胎牛血清和青鏈霉素溶液以體積比為100∶10∶1的比例混合得到混合培養液；

第二步：將1x10⁷高轉移人肝癌細胞MHCC97H混懸在10ml第一步獲得的混合培養液中，隨后置入10ml的RWV生物反應器中，并置入生物可降解支架聚乙醇酸-乳酸共聚物，先靜止10min再以速度7rpm～8rpm旋轉培養10～15min，重復三次，然后靜止30分鐘，后以速度7rpm～8rpm旋轉培養過夜，次日根據細胞團塊的大小調節旋轉培養速度，以懸浮在一個水平位置且不觸及RWV反應器壁為宜，每36小時更換一次培養液，培養15天，得到類組織體。

2.如權利要求1所述的一種三維轉移性肝癌類組織體外模型的構建方法，其特征在于，所述的青鏈霉素溶液是將青霉素和鏈霉素溶于0.85g/100ml氯化鈉溶液中得到，所述的青霉素的濃度是10000單位/ml，所述的鏈霉素的濃度是10000單位/ml。

3.如權利要求1所述的一種三維轉移性肝癌類組織體外模型的構建方法，其特征在于，所述生物可降解支架聚乙醇酸-乳酸共聚物的長、寬和高分別為3～4mm、3～4mm和0.8～1.2mm。