[發明專利]一種低聚原花青素的提取方法

無效

• 申請號: 200910048064.8
• 申請日: 2009-03-24
• 公開（公告）號: CN101845035A
• 公開（公告）日: 2010-09-29
• 發明（設計）人: 高雯;夏玉葉;閔旸;王曙光;蓋春艷;韓竹箴;陳述增
• 申請（專利權）人: 上海醫藥工業研究院
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62;B01D15/34;B01J20/26
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 薛琦;朱水平

1.一種提取低聚原花青素的方法，其特征在于其包括如下步驟：將含低聚原花青素的植物原料用溶劑提取所得的粗提物上大孔吸附樹脂柱，用水洗脫除去蛋白質和多糖類雜質，之后再用下述有機溶劑中的一種或多種與水作為洗脫劑進行梯度洗脫：乙醇、甲醇和丙酮，收集以體積比為4∶1∶5的正丁醇、醋酸和水的混合溶液靜置分層后的上層溶液為展開劑，硅膠薄層層析板上Rf值為0.2～0.5的洗脫部分，即得低聚原花青素提取物。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的含低聚原花青素的植物原料為松樹皮、葡萄籽或沙棘籽。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于：所述的沙棘籽為沙棘提取完沙棘油后的沙棘籽渣滓。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的溶劑提取的方式為常規溶劑提取、微波輔助溶劑提取、超聲溶劑提取或超臨界流體萃取。

5.如權利要求1或4所述的方法，其特征在于：

所述的溶劑提取中，提取溶劑為下述有機溶劑中的一種或多種與水的混合溶劑：乙醇、甲醇、丙醇、丁醇、丙酮和乙酸乙酯；混合溶劑的濃度為體積百分比10～95％有機溶劑的水溶液；每次提取中，混合溶劑的用量為2～20ml/1g植物原料；溶劑提取的溫度為10～100℃；溶劑提取的次數為2～5次；每次溶劑提取的時間為20分鐘～5小時；

采用微波輔助溶劑提取時，采用恒功率或恒溫的微波輻照方式；

采用超臨界流體萃取時，超臨界流體為CO₂，夾帶劑選自甲醇、乙醇和丙酮中的一種或多種，或不使用夾帶劑。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的大孔吸附樹脂為下述類型的大孔吸附樹脂：HP-20、HP-2MG、SP207、SP850、XAD16、XAD1600、XAD7HP、D-101、AB-8、MCI或HPD。

7.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的大孔吸附樹脂的徑長比為1∶5～1∶45；大孔吸附樹脂的用量為上樣質量的30～120倍。

8.如權利要求1所述的方法，其特征在于：將粗提物上大孔吸附樹脂柱的上樣方法為濕法上樣，以0.1～5倍柱體積/小時的流速上樣進柱，上樣溫度為10～60℃。

9.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的用水洗脫除去蛋白質和多糖類雜質的步驟中，水的用量為1～8倍柱體積，用水洗脫的流速為1～5倍柱體積/小時，用水洗脫的溫度為10～60℃。

10.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的梯度洗脫的洗脫梯度在體積比0％有機溶劑和體積比100％有機溶劑的濃度范圍內選擇，每個梯度的洗脫液的用量為5～20柱體積，洗脫的流速為1～5倍柱體積/小時，梯度洗脫的溫度為10～60℃。

11.如權利要求1所述的方法，其特征在于：

所述的大孔吸附樹脂柱為D101大孔吸附樹脂，所述的梯度洗脫中，洗脫梯度依次為：5％乙醇水溶液，40％乙醇水溶液，純乙醇，收集40％乙醇水溶液的洗脫部分；

或者，所述的大孔吸附樹脂柱為AB-8型大孔吸附樹脂，所述的梯度洗脫中，洗脫梯度依次為：40％丙酮水溶液，純丙酮，收集40％丙酮水溶液的洗脫部分；

或者，所述的大孔吸附樹脂柱為HP-20大孔吸附樹脂，所述的梯度洗脫中，洗脫梯度依次為20％甲醇水溶液，40％甲醇水溶液，純甲醇，收集20％甲醇水溶液的洗脫部分，以及部分40％甲醇水溶液的洗脫部分；

或者，所述的大孔吸附樹脂柱為SP207大孔吸附樹脂，所述的梯度洗脫中，洗脫梯度依次為10％乙醇水溶液、50％乙醇水溶液，純乙醇，收集10％甲醇水溶液的洗脫部分和部分50％甲醇的洗脫部分；

百分比為體積百分比。

12.如權利要求1所述的方法，其特征在于：將權利要求1的方法所制得的低聚原花青素提取物再進行凝膠柱分離提純，以水、乙醇、甲醇、丙酮和氯仿中的一種或多種為洗脫劑，收集以體積比為4∶1∶5的正丁醇、醋酸和水的混合溶液靜置分層后的上層溶液為展開劑，硅膠薄層層析板上Rf值為0.2～0.5的洗脫部分，即得進一步提純后的低聚原花青素提取物。