[發明專利]一種檢測氯霉素的酶聯免疫試劑及方法

無效

• 申請號: 200910045166.4
• 申請日: 2009-01-12
• 公開（公告）號: CN101526537A
• 公開（公告）日: 2009-09-09
• 發明（設計）人: 聶繼斌;唐俊;楊宏;溫俊梅;齊欣;吳青;李成;楊宗繁
• 申請（專利權）人: 深圳市綠詩源生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/543;G01N33/566;G01N33/52;G01N33/535
• 代理公司: 深圳市深遠專利商標事務所
• 代理人: 褚治保

1.一種檢測動物源性食品中氯霉素的酶聯免疫試劑盒，其特征是，它含有：

(1)包被氯霉素抗原的酶聯板或包被抗抗體的酶聯板；

(2)酶標記物；

(3)氯霉素特異性抗體；

(4)氯霉素標準品溶液；

(5)底物顯色液；

(6)終止液；

(7)濃縮洗滌液；

(8)濃縮復溶液；

試劑盒中氯霉素包被抗原是采用活潑酯法將氯霉素半抗原與牛丙種球蛋白進行偶聯得到的，抗抗體為羊抗鼠抗抗體或羊抗兔抗抗體，羊抗鼠抗抗體是以鼠源抗體為免疫原對無病原體山羊進行免疫得到，羊抗兔抗抗體是以兔源抗體為免疫原對無病原體山羊進行免疫得到。

2.如權利要求1所述的檢測動物源性食品中氯霉素的酶聯免疫試劑盒，其特征是，試劑盒中酶標記物為酶標記抗抗體或酶標記氯霉素抗原，所用酶為過氧化物酶或半乳糖甘酶；酶標記物形式為凍干粉、濃縮液或工作液。

3.如權利要求2所述的檢測動物源性食品中氯霉素的酶聯免疫試劑盒，其特征是，所用的酶為過氧化物酶。

4.如權利要求2或3所述的檢測動物源性食品中氯霉素的酶聯免疫試劑盒，其特征是，試劑盒中酶標記抗原是采用活性酯法將標記酶與氯霉素半抗原進行偶聯得到。

5.如權利要求4所述的檢測動物源性食品中氯霉素的酶聯免疫試劑盒，其特征是，試劑盒中氯霉素特異性抗體為鼠源單克隆抗體或兔源多克隆抗體，免疫原是采用活潑酯法將氯霉素半抗原與鑰孔槭血藍蛋白進行偶聯得到的；抗體形式為凍干粉、濃縮液或工作液；抗體稀釋液為pH值8.2、0.05mol/L、含有3％w/v馬血清和5‰w/v明膠的磷酸鹽緩沖液。

6.如權利要求5所述的檢測動物源性食品中氯霉素的酶聯免疫試劑盒，其特征是，試劑盒中當標記酶為過氧化物酶時底物顯色液為過氧化氫或過氧化脲、四甲基聯苯胺硫酸鹽混合溶液、終止液為0.1-0.5mol/L的硫酸或鹽酸緩沖液；當標記酶為半乳糖甘酶時，底物顯色液為0.5mol/L磷酸鉀緩沖液，終止液為2mol/L的檸檬酸緩沖液；濃縮洗滌液為去離子水或三蒸水；濃縮復溶液為去離子水或三蒸水。

7.如權利要求6所述的檢測動物源性食品中氯霉素的酶聯免疫試劑盒，其特征是，制備酶聯板過程中所用的包被緩沖液為批pH值9.6、0.05mol/L的碳酸鹽緩沖液；包被氯霉素抗原或抗抗體的載體物質為聚苯乙烯、纖維素、聚丙烯酰胺、聚乙烯、聚丙烯、交聯葡聚糖、玻璃、硅橡膠或瓊脂糖凝膠；載體的形式是試管、微量反應板凹孔、小珠或小圓片；洗滌液為去離子水或三蒸水；封閉液是含有15％-30％w/v的馬血清和1％w/v惰性蛋白的溶液。

8.如權利要求1-3和5-7任一項所述的檢測動物源性食品中氯霉素的酶聯免疫試劑盒，其特征是，試劑盒中氯霉素標準品溶液為六個濃度梯度的氯霉素溶液，氯霉素稀釋液為去離子水或三蒸水，氯霉素標準溶液濃度為：0μg/L、0.025μg/L、0.075μg/L、0.225μg/L、0.675μg/L、2.025μg/L，1-3ml/瓶。

9.如權利要求4所述的檢測動物源性食品中氯霉素的酶聯免疫試劑盒，其特征是，試劑盒中氯霉素標準品溶液為六個濃度梯度的氯霉素溶液，氯霉素稀釋液為去離子水或三蒸水，氯霉素標準溶液濃度為：0μg/L、0.025μg/L、0.075μg/L、0.225μg/L、0.675μg/L、2.025μg/L，1-3ml/瓶。

10.一種檢測動物源性食品中氯霉素的方法，包括以下步驟：

(1)樣品前處理；

(2)用權利要求1-9任一所述的試劑盒進行檢測；

(3)分析檢測結果。