[發明專利]一種長春堿類生物堿的分離純化方法

有效

• 申請號: 200910042236.0
• 申請日: 2009-08-28
• 公開（公告）號: CN101638413A
• 公開（公告）日: 2010-02-03
• 發明（設計）人: 黃翔;馮錦玲;陳日星;張燕娜;羅展良;梁麗思
• 申請（專利權）人: 廣州漢方現代中藥研究開發有限公司
• 主分類號: C07D519/04
• 分類號: C07D519/04
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司
• 代理人: 陳 衛

1.一種長春堿類生物堿的分離純化方法，其特征在于包括如下 步驟：

(1)粗品的預處理：將長春堿類生物堿粗品濕法上于氧化鋁柱上，所 述氧化鋁柱的固定相所用的填料為中性氧化鋁，粒度為100～200目， 生物堿粗品與氧化鋁的配比為質量比1∶10～1∶40，其流動相所用 溶劑為二氯甲烷或三氯甲烷，薄層層析跟蹤柱層析分離情況，收集生 物堿流份，合并后減壓濃縮至干，得預處理制品；

(2)高效液相色譜分離：先制備色譜柱固定相，填料為硅膠，預處理 制品進樣后，用三氯甲烷-甲醇或二氯甲烷-乙醇作為流動相進行梯度 洗脫，檢測器跟蹤制備色譜分離情況，薄層層析或高效液相檢測，合 并富含長春堿流份；

(3)重結晶：將生物堿流份于30～50℃減壓濃縮至干，用1～5倍體 積低級脂肪醇溶解，然后于-20～-10℃放置結晶，過濾，干燥后得 到高純度的長春堿類生物堿；

步驟(2)高效液相色譜分離是將預處理制品先用1～2倍二氯甲烷或 三氯甲烷溶解，過濾后進樣，將流動相加至色譜柱中進行洗脫，控制 流速40～50ml/min，柱壓保持在80～100bar，通過檢測器跟蹤分離情 況，薄層層析檢測，收集富含生物堿流份；

步驟(1)所述長春堿類生物堿為長春堿、長春新堿或長春瑞濱；

步驟(3)中，所述低級脂肪醇為甲醇、乙醇、丙醇及其混合溶液。

2.根據權利要求1所述的長春堿類生物堿的分離純化方法，其 特征在于步驟(2)所述分離生物堿與硅膠的質量比為1∶20～1∶60， 流動相所用溶劑為二氯甲烷-乙醇或三氯甲烷-甲醇。