[發(fā)明專利]象鼻蘭的種苗試管繁殖方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910039929.4
• 申請日: 2009-06-02
• 公開（公告）號: CN101584298A
• 公開（公告）日: 2009-11-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 段俊;陳之林;曾宋君;吳坤林
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院華南植物園
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 廣州科粵專利代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 余炳和;李繼蘭

1.象鼻蘭的種苗試管繁殖方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)材料：選取生長健壯的象鼻蘭母株，于開花時(shí)進(jìn)行人工授粉，將授粉后發(fā)育至成熟而未開裂時(shí)的果實(shí)做為外植體用于播種；

(2)無菌播種或原球莖的增殖并分化培養(yǎng)：

a、無菌播種：將所述外植體用70％-80％的酒精浸泡30-60秒后置于0.1％-0.2％的升汞溶液中消毒10-20分鐘，再用無菌水漂洗4～5次后切開果實(shí)，將其粉末狀胚接種培養(yǎng)到種子萌發(fā)培養(yǎng)基上，所述的種子萌發(fā)培養(yǎng)基為改良的Knudson?C培養(yǎng)基附加體積百分比5％-10％的椰子汁，其中改良的Knudson?C培養(yǎng)基每升含硫酸銨400-600mg，磷酸二氫鉀200-300mg，硫酸鎂200-300mg，硝酸鈣500-1500mg，硫酸錳5-10mg，硫酸亞鐵20-40mg，蔗糖15～30g，瓊脂6～7g，活性炭0.5～2g，肌醇80-120毫克，甘氨酸1.5-2.5毫克，鹽酸硫胺素(VB1)0.05-0.2毫克，鹽酸吡哆醇(VB6)0.4-0.8毫克，煙酸0.4-0.8毫克，pH?5.4-5.6；

b、原球莖的增殖并分化培養(yǎng)：將原球莖培養(yǎng)在所述的改良Knudson?C培養(yǎng)基附加體積百分比5％-10％的椰子汁再附加TDZ?0.01-0.2毫克/升的培養(yǎng)基上，在原球莖上獲得大量的類原球莖或/和愈傷組織，再將這些類原球莖或/和愈傷組織培養(yǎng)在改良的Knudson?C培養(yǎng)基附加體積百分比5％-10％的椰子汁再附加活性炭0.5～2g/L的培養(yǎng)基上，所述的改良的Knudson?C培養(yǎng)基的組分如步驟(2)a中所述；

(3)壯苗培養(yǎng)：將在上述無菌播種培養(yǎng)所得的小植株或通過原球莖增殖并分化而得的小苗接種培養(yǎng)到壯苗培養(yǎng)基上，所述的壯苗培養(yǎng)基每升含花寶1號1～3g，蛋白胨0.5～3g，萘乙酸0.5-3mg、香蕉勻漿50-100g、活性炭0.5～2g，蔗糖15～30g，瓊脂6～7g，肌醇80-120毫克，甘氨酸1.5-2.5毫克，鹽酸硫胺素(VB1)0.05-0.2毫克，鹽酸吡哆醇(VB6)0.4-0.8毫克，煙酸0.4-0.8毫克，pH?5.4-5.6；

(4)試管苗移栽：當(dāng)植株3-5厘米高時(shí)，將培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到自然光下煉苗10-15天，然后將其從培養(yǎng)瓶中取出，洗凈根部的培養(yǎng)基，移入蘭石∶蕨根∶泥炭為1∶0.5～2∶0.5～2的混合基質(zhì)中；

上述步驟(2)～(3)中培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度24-28℃，光照度1500～2000lx，光照12-16小時(shí)/天。