[發明專利]一種藻菌混合微生物制劑及其制法和應用

無效

• 申請號: 200910039771.0
• 申請日: 2009-05-27
• 公開（公告）號: CN101560484A
• 公開（公告）日: 2009-10-21
• 發明（設計）人: 黨志;唐霞;何麗媛;易筱筠
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/12;C02F3/34;C12R1/89;C12R1/38;C12R1/01;C02F101/32
• 代理公司: 廣州粵高專利代理有限公司
• 代理人: 何淑珍

1.一種藻菌混合微生物制劑，其特征在于：由無菌純柵藻、洋蔥伯克霍爾德氏菌GS3C(Burkholderia?cepacia)、鞘氨醇單胞菌GY2B(sphingomonas)、芘降解菌GP3：假單胞菌GP3A(Pseudomonas)和伯克氏菌GP3B(Pandoraea?pnomenusa)組成；所述無菌純柵藻是由柵藻除菌純化后得到；GS3C的保藏編號為CCTCC?M?207169，GY2B的保藏編號為CCTCC?M206019，GP3A的保藏編號為CCTCC?NO：M?207166，GP3B的保藏編號為CCTCC?NO：M207167。

2.制備權利要求1所述的一種藻菌混合微生物制劑的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)利用平板分離法得到單種柵藻；

(2)用溶菌酶緩沖液對柵藻進行預處理；

(3)利用抗生素對柵藻進行除菌，得到無菌純柵藻；

(4)微生物接種量為：純柵藻與總石油組分降解菌按照2∶1體積比例接種培養基，總石油組分降解菌為GS3C、GY2B、GP3A和GP3B按照等體積比混合；

(5)擴大培養條件：培養基為BG11培養液，在溫度為25±1℃，轉速150rmp的光照搖床培養，光照強度為8000LX，光暗比L/D＝14∶10，將接種后的培養液擴大培養培養7～10天，即得本發明的藻菌混合微生物制劑；

所述本發明的藻菌混合微生物制劑由純柵藻、GY2B、GS3C、GP3A和GP3B組成。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述的溶菌酶緩沖液中Tween80濃度為0.005mol/l，EDTA濃度為0.1mol/l，SDS濃度為0.25mol/l，溶菌酶濃度為0.5g/l。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述的預處理為在柵藻中加入溶菌酶緩沖液放置10分鐘后，離心倒掉上清液，加入滅菌蒸餾水重復洗滌三次。

5.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述的抗生素為青霉素、鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、利福平和四環素中的一種以上。

6.權利要求1所述的藻菌混合微生物制劑在水域石油污染生物修復中的應用。?