[發(fā)明專利]一種從肝素副產物純化硫酸乙酰肝素的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200910039359.9 | 申請日: | 2009-05-11 |
| 公開(公告)號: | CN101885787A | 公開(公告)日: | 2010-11-17 |
| 發(fā)明(設計)人: | 李鋰;李坦 | 申請(專利權)人: | 深圳市海普瑞藥業(yè)股份有限公司 |
| 主分類號: | C08B37/10 | 分類號: | C08B37/10 |
| 代理公司: | 廣州知友專利商標代理有限公司 44104 | 代理人: | 宣國華 |
| 地址: | 518057 廣東*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 肝素 副產物 純化 硫酸 乙酰 方法 | ||
1.一種從肝素副產物純化硫酸乙酰肝素的方法,其特征在于:所述方法包括下述步驟:
a、肝素副產物溶解為質量分數2-10%的溶液,加入醋酸鉀使溶液濃度為20-80%,以醋酸調節(jié)pH值為5-7,2-8℃沉淀1-7天,離心取清液;
b、加入0.5-1.6倍體積的斑氏試劑、0.05-0.2倍體積的飽和氫氧化鈉,攪拌,室溫沉淀10-60分鐘,離心取清液;
c、溶解沉淀,重復上一步驟;
d、合并b和c中的清液,調節(jié)pH值為中性;
f、上一根陰離子交換層析柱,以濃度為0.1-0.6M的氯化鈉洗去銅離子;
g、以氯化鈉濃度為0-2.5M線性梯度洗脫,收集洗脫液,蒸發(fā)濃縮,過濾,向濾液中加1/4體積水,以乙醇沉淀,離心收集沉淀,烘干。
2.如權利要求1所述的從肝素副產物純化硫酸皮膚素的方法,其特征在于:步驟a中所述肝素副產物溶解濃度質量分數5%-9%的溶液。
3.如權利要求1或2所述的從肝素副產物純化硫酸皮膚素的方法,其特征在于:步驟a中所述肝素副產物溶解濃度質量分數8%的溶液。
4.如權利要求1所述的從肝素副產物純化硫酸皮膚素的方法,其特征在于:步驟b中所述斑氏試劑的量為0.6-1.2倍的體積,所述飽和氫氧化鈉的量為0.08-0.15倍的體積。
5.如權利要求1或4所述的從肝素副產物純化硫酸皮膚素的方法,其特征在于:步驟b中所述斑氏試劑的量為0.8倍的體積,所述飽和氫氧化鈉的量為0.1倍的體積。
6.如權利要求1所述的從肝素副產物純化硫酸皮膚素的方法,其特征在于:步驟f中所述陰離子交換層析柱為Q-Sepharose?FF、DEAE-SepharoseFF陰離子交換層析柱。
7.如權利要求1所述的從肝素副產物純化硫酸皮膚素的方法,其特征在于:步驟f中所述氯化鈉濃度為0.2-0.4M。
8.如權利要求1或6所述的從肝素副產物純化硫酸皮膚素的方法,其特征在于:步驟f中所述氯化鈉濃度為0.3M。
9.如權利要求1所述的從肝素副產物純化硫酸皮膚素的方法,其特征在于:步驟g中所述離心為3000rpm離心30min。
10.如權利要求1所述的從肝素副產物純化硫酸皮膚素的方法,其特征在于:步驟g中所述蒸發(fā)濃縮為65℃真空旋轉蒸發(fā)濃縮5倍。
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