[發明專利]水稻干尖線蟲的檢測方法及診斷試劑盒無效
| 申請號： | 200910037297.8 | 申請日： | 2009-02-20 |
| 公開（公告）號： | CN101812501A | 公開（公告）日： | 2010-08-25 |
| 發明（設計）人： | 崔汝強;卓侃;胡學難;孫曉棠;廖金鈴;鐘國強;郭權;王衛芳 | 申請（專利權）人： | 崔汝強 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 廣州三環專利代理有限公司 44202 | 代理人： | 戴建波 |
| 地址： | 510623 廣東省廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 水稻 線蟲 檢測 方法 診斷 試劑盒 | ||
1.一種檢測水稻干尖線蟲（Aphelenchoides?besseyi?Christie）的方法，其包括：
從可疑植物材料或土樣中分離出待檢測線蟲，提取DNA;
以步驟（a）中獲得的DNA為模板，使用SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO:2的引物對，進行聚合酶鏈式反應，得到擴增產物；
檢測步驟（b）中獲得的擴增產物，根據檢測結果判斷水稻干尖線蟲的存在。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，當所述可疑植物材料或土樣中存在大量線蟲時，采用酚氯仿提取法提取DNA。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，當所述可疑植物材料或土樣只存在單條線蟲時，步驟（a）中所述的提取包括以下步驟：
（1）將單條線蟲加入含有WLB溶液的管中；
（2）于-70℃放置30~60?min；95℃放置15~20?min；55~65℃放置2min；
（3）再加入蛋白酶K，55~65℃處理30?min~2?h；95℃處理15~20min，以獲得作為單條線蟲DNA模板的產物。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述植物材料為水稻植株或種子。
5.?如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述植物材料是草莓、玉米、甘薯、大豆、蔬菜、蘭花、菊花或大麗花的植株。
6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（c）中所述檢測步驟（b）中獲得的擴增產物的方法為電泳檢測。
7.一種用于診斷水稻干尖線蟲病的試劑盒，其包含SEQ?ID?NO:1和SEQ?ID?NO:2的引物對。
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