[發(fā)明專利]一種地龍蛋白多肽制劑無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200910033499.5 | 申請日： | 2009-06-15 |
| 公開（公告）號： | CN101584853A | 公開（公告）日： | 2009-11-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 詹秀琴;戴啟剛;郭立瑋;樊文玲 | 申請（專利權(quán)）人： | 南京中醫(yī)藥大學 |
| 主分類號： | A61K38/02 | 分類號： | A61K38/02;A61P9/12;A61K35/64 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標事務(wù)所(普通合伙) | 代理人： | 成立珍 |
| 地址： | 210046江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 地龍 蛋白 多肽 制劑 | ||
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種蛋白多肽制劑，具體是涉及一種地龍蛋白多肽制劑，及其制備方法和其 在防治高血壓疾病中應用
背景技術(shù)
地龍，性寒味咸，具清熱熄風、平喘、通絡(luò)、利尿之功，用于高熱神昏，關(guān)節(jié)痹通、肢 體麻木，肺熱喘咳，高血壓等癥，藥理研究發(fā)現(xiàn)，它不但抗凝、抑制血小板聚集、抗心律失 常、而且還有抗癌和鎮(zhèn)痛的作用，地龍勻漿得到的粗提物成分復雜，分子量在12000至80000D 范圍內(nèi)，除了上述大分子外，地龍還含有一些小分子，如地龍素、地龍解熱堿，核酸衍生物 及維生素和無機鹽等，目前地龍的臨床用藥主要是地龍勻漿得到的粗提物。
現(xiàn)有技術(shù)中分離地龍中蛋白類成分成分，通常采用勻漿液進行鹽析、離子交換層析、凝 膠過濾層析等生化分離手段，雖然具有一定的可行性，但步驟繁雜，實驗條件要求高，不適 合大規(guī)模生產(chǎn)，且與中醫(yī)辨證用藥大相徑庭。
蛋白多肽類成分是地龍的主要有效成分，由于蛋白多肽類成分性質(zhì)不穩(wěn)定，對環(huán)境要求 較高，酸、堿、離子強度、溫度或光照對其活性均會產(chǎn)生影響，因而傳統(tǒng)的以水煎入藥，影 響了其藥效的發(fā)揮。
發(fā)明內(nèi)容：
發(fā)明目的：本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種抗高血壓效果好的地龍 蛋白多肽制劑，本發(fā)明另一個目的是提供該地龍蛋白多肽制劑的制備方法和其在防治高血壓 疾病中應用。
技術(shù)方案：為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明提供的地龍蛋白多肽制劑，它由以下方法制備得 到：
①取地龍，加入3至5倍量的蒸餾水，勻漿10至30分鐘，在4℃下以11000至15000r/min 離心20至30分鐘，取離心后的地龍上清液，備用；
②取步驟①得到的地龍上清液，加入濃度為200至250U/mg的胰蛋白酶，濃度為800至 1000U/mg的糜蛋白酶和濃度為20至30U/mg的彈性蛋白酶，使酶的重量百分比達到3％至5％， 然后加入氫氧化鈉調(diào)pH值至7.8至8.0，在45至50℃水浴酶解1至6小時；
③取步驟②得到的酶解液和藥學上可接受的載體制備得到地龍蛋白多肽制劑。
本發(fā)明提供的地龍蛋白多肽制劑，其中步驟①加入的蒸餾水為二次蒸餾，加入量為藥材 量的3倍，勻漿時間為10分鐘，4℃下以11000r/min離心20分鐘。
作為優(yōu)選方案，其中步驟②加入濃度為200U/mg的胰蛋白酶、濃度為1000U/mg的糜蛋 白酶和濃度為30U/mg的彈性蛋白酶，使酶的重量百分比達到3％，然后加入氫氧化鈉調(diào)pH 值至8.0，以50℃水浴酶解5小時。
本發(fā)明提供的以上地龍蛋白多肽制劑的制備方法包括以下步驟：
①取地龍，加入3至5倍量的蒸餾水，勻漿10至30分鐘，在4℃下以11000至15000r/min 離心20至30分鐘，取離心后的地龍上清液，備用；
②取步驟①得到的地龍上清液，加入濃度為200至250U/mg的胰蛋白酶，濃度為800至 1000U/mg的糜蛋白酶和濃度為20至30U/mg的彈性蛋白酶，使酶的重量百分比達到3％至5％， 然后加入氫氧化鈉調(diào)pH值至7.8至8.0，在45至50℃水浴酶解1至6小時；
③取步驟②得到的酶解液和藥學上可接受的載體制備得到地龍蛋白多肽制劑。
作為優(yōu)選方案，以上制備方法中步驟①加入的蒸餾水為二次蒸餾，加入量為藥材量的3 倍，勻漿時間為10分鐘，4℃下以11000r/min離心20分鐘。其中步驟②加入濃度為200U/mg 的胰蛋白酶、濃度為1000U/mg的糜蛋白酶和濃度為30U/mg的彈性蛋白酶，使酶的重量百分 比達到3％，然后加入氫氧化鈉調(diào)pH值至8.0，以50℃水浴酶解5小時。
本發(fā)明提供的另一種地龍蛋白多肽制劑，它由以下方法制備得到：
①取地龍，加入3至5倍量的蒸餾水，勻漿10至30分鐘，在4℃下以11000至15000r/min 離心20至30分鐘，取離心后的地龍上清液，備用；
②取步驟①得到地龍上清液，加入濃度為200至250U/mg的胰蛋白酶、濃度為800至 1000U/mg的糜蛋白酶和濃度為20至30U/mg的彈性蛋白酶，使酶的重量百分比達到3％至5％， 然后加入氫氧化鈉調(diào)pH值至7.8至8.0，以45至50℃水浴酶解1至6小時；
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