[發(fā)明專利]L-2-氨基丁酸酶法轉(zhuǎn)化制備方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 200910030982.8 | 申請(qǐng)日: | 2009-04-21 |
| 公開(公告)號(hào): | CN101538596A | 公開(公告)日: | 2009-09-23 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 焦慶才;劉均忠;陳爭(zhēng)依;董凱;趙根海;劉茜 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 南京大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C12P13/04 | 分類號(hào): | C12P13/04;C12R1/69;C12R1/645;C12R1/05;C12R1/32;C12R1/38 |
| 代理公司: | 南京知識(shí)律師事務(wù)所 | 代理人: | 胡錫瑜 |
| 地址: | 210097*** | 國(guó)省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 氨基 丁酸 轉(zhuǎn)化 制備 方法 | ||
1.一種L-2-氨基丁酸的酶法轉(zhuǎn)化制備方法,其特征是由以下步驟構(gòu)成:
(1)以DL-2-氨基丁酸為起始原料,用醋酐乙酰化得N-乙酰-DL-2-氨基丁酸;
(2)將具有氨基酰化酶活性的基因工程菌1016菌體細(xì)胞或該菌體細(xì)胞氨基酰 化酶提取液與pH7~10的N-乙酰-DL-2-氨基丁酸水溶液混合,加入表面活性劑 和終濃度10-4mol/L鈷離子,在40℃~60℃條件下進(jìn)行酶促反應(yīng);
(3)通過等電點(diǎn)結(jié)晶法或等電點(diǎn)結(jié)晶與離子交換樹脂相結(jié)合的方法對(duì)反應(yīng)生成 物進(jìn)行分離,得到高純度的L-2-氨基丁酸;
(4)反應(yīng)液中剩余的N-乙酰-D-2-氨基丁酸經(jīng)冰醋酸和醋酐混合液消旋,得N- 乙酰-DL-2-氨基丁酸,再次用于酶促拆分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的L-2-氨基丁酸酶法轉(zhuǎn)化制備方法,其特征在于步驟(2) 所用的N-乙酰-DL-2-氨基丁酸水溶液濃度為50g/L~500g/L,溶液pH7~10, 調(diào)溶液pH所用的無機(jī)堿為碳酸鈉或碳酸氫鈉或氫氧化鈉或氫氧化鉀。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的L-2-氨基丁酸酶法轉(zhuǎn)化制備方法,其特征在于步驟(2) 所述的表面活性劑為吐溫-80或十六烷基三甲基溴化銨或聚乙二醇辛基苯基醚, 其濃度為0.05g/L~50g/L。
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