[發(fā)明專利]抗多種艾滋病毒的組合疫苗及其組合方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910027615.2
• 申請(qǐng)日: 2009-05-25
• 公開（公告）號(hào): CN101569745A
• 公開（公告）日: 2009-11-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐建青;萬(wàn)延民
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州工業(yè)園區(qū)唯可達(dá)生物科技有限公司
• 主分類號(hào): A61K39/295
• 分類號(hào): A61K39/295;A61K39/21;A61K48/00;A61P31/18
• 代理公司: 蘇州市新蘇專利事務(wù)所有限公司
• 代理人: 許鳴石

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及預(yù)防艾滋病毒傳播的技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種抗多種艾滋病毒的組合疫苗及其組合方法。

背景技術(shù)

研制有效的艾滋病疫苗是當(dāng)前迫切任務(wù)之一。由于艾滋病病毒(HumanImmunodeficiency?Virus，HIV)的遺傳多樣性、基因的持續(xù)性突變以及多重的免疫逃逸機(jī)制，使研制有效的艾滋病疫苗成為人類當(dāng)今所面臨的最為重大的挑戰(zhàn)。2003年VaxGen公司在歐美同性戀人群和泰國(guó)吸毒人群完成的兩個(gè)III期臨床試驗(yàn)，分別測(cè)試了以單一B亞型gp120或B與E兩種亞型gp120為免疫原、以活化中和抗體為主的艾滋病疫苗，但均以失敗而告終；繼此臨床試驗(yàn)失敗之后，另一個(gè)規(guī)模更大的艾滋病疫苗III期臨床試驗(yàn)?zāi)壳罢谶M(jìn)行之中。此試驗(yàn)招募了16000名18-30歲志愿者，接受疫苗與安慰劑的比例為1∶1，所接種的疫苗以病毒載體疫苗ALVAC-HIV(vCP1521)作初免、蛋白疫苗AIDSVAX?B/E(gp120)作加強(qiáng)。此疫苗以活化抗體為主、活化細(xì)胞免疫為輔，其有效性尚有待于其后的詳盡數(shù)據(jù)分析結(jié)果。

2007年9月艾滋病疫苗研究又遭受了災(zāi)難性打擊，Merck公司研制的將HIV-1三個(gè)蛋白(gag，pol，nef)為免疫原的非復(fù)制型腺病毒載體疫苗在II?b期臨床實(shí)驗(yàn)中也以失敗告終。此疫苗以活化HIV-1特異性T細(xì)胞免疫為主，該疫苗既無法保護(hù)志愿者免遭病毒的感染，也不能減少艾滋病毒在感染者體內(nèi)的病毒數(shù)量。

我國(guó)已經(jīng)先后在2005年與2007年啟動(dòng)了兩個(gè)艾滋病疫苗的臨床試驗(yàn)。第一個(gè)由長(zhǎng)春百克生物公司/吉林大學(xué)研制的DNA和安卡那株痘苗病毒艾滋病疫苗于2005年3月啟動(dòng)1期臨床試驗(yàn)。此疫苗采用裸DNA與非復(fù)制型重組安卡那株痘苗病毒(Modified?Vaccinia?Virus?Ankara，MVA)為載體，插入我國(guó)流行株CRF08_BC來源的免疫原基因進(jìn)行聯(lián)合免疫。研究結(jié)果顯示，此疫苗安全可靠，可以活化HIV特異性的T細(xì)胞。第二個(gè)艾滋病疫苗由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心與北京生物制品研究所聯(lián)合研制，此疫苗由DNA疫苗和復(fù)制性天壇株痘苗載體疫苗構(gòu)成，插入我國(guó)流行株CRF07BC來源的免疫原基因，艾滋病疫苗目前正在進(jìn)行I期臨床試驗(yàn)。我國(guó)的2個(gè)艾滋病疫苗均以活化HIV特異性T細(xì)胞為主，不能活化有效的中和抗體。

鑒于中和抗體在過繼免疫研究中的有效保護(hù)作用以及在膜蛋白中相應(yīng)保守中和表位的確定，對(duì)新一代的中和抗體疫苗的研究也在不斷深入。研究表明，利用gp140三聚體或病毒樣顆粒為免疫原可活化一定量的中和抗體[JVirol.2003.77：p.11244-59；J?Virol.2004.78：p.4710-9；AIDS?Res?HumRetroviruses.2004.20：p.425-34]，利用多種亞型的膜蛋白(A、B、C亞型)混合免疫可獲得對(duì)疫苗株來源的不同亞型病毒株的中和抗體[Gene?Ther.2004.11：p.1146-54]，但上述方法所活化抗體均不具備廣譜中和能力。有趣的是，病毒對(duì)中和抗體的敏感性很大程度上由gp120的V1/V2區(qū)決定，但保守的中和表位(如IgG1b12、2G12以及2F5等相應(yīng)表位)不受V1/V2區(qū)影響[J?Virol.2004.78：p.5205-15]；因而，以提高保守表位免疫原性為目標(biāo)的抗原改造是勢(shì)在必行。鑒于gp120的高度變異以及保守表位的弱免疫原性，轉(zhuǎn)而利用gp120與CD4結(jié)合形成的中間復(fù)合體(CD4i表位)作為免疫原的疫苗研究亦在進(jìn)行。有研究顯示，此復(fù)合體可以活化有效的中和抗體，免疫后的兔子血清可以中和的絕大部分病毒株[Proc?Natl?Acad?Sci?U?S?A.2002.99：p.11842-7]。由于CD4結(jié)合而暴露的位于輔助受體結(jié)合位點(diǎn)的中和表位(CD4i表位)非常保守、不受糖基化影響，因而，此疫苗有可能阻斷病毒的不同逃逸機(jī)制[Nature，2003.422：p.307-12；Nature，2002.420：p.678-82]。但利用此復(fù)合體免疫能產(chǎn)生人免疫球蛋白的轉(zhuǎn)基因鼠后，不能活化有效的中和抗體[Vaccine.2003.21：p.4421-9]，因而，此疫苗的有效性尚有待于臨床研究進(jìn)一步驗(yàn)證。

由于目前已確定在膜蛋白上存在保守的中和表位，因而，目前大多這方面研究的目標(biāo)是提高這些保守中和表位的免疫原性。所采取的策略主要包括以下幾類：