[發明專利]具有抗腫瘤活性的靈芝子實體提取物及其制備方法

無效

• 申請號: 200910027230.6
• 申請日: 2009-05-25
• 公開（公告）號: CN101559083A
• 公開（公告）日: 2009-10-21
• 發明（設計）人: 陳彥;賈曉斌;宋師花
• 申請（專利權）人: 江蘇省中醫藥研究院
• 主分類號: A61K36/074
• 分類號: A61K36/074;A61P35/00
• 代理公司: 南京知識律師事務所
• 代理人: 栗仲平

1.一種具有抗腫瘤活性的靈芝子實體提取物，其特征在于，其中三萜 類成分的含量為30～70wt％；同時，該提取物中的有效成分還用以下方法表 征：用高效液相色譜條件1表征提取物，由色譜峰保留時間在80～128min之 間的成分組成；用高效液相色譜條件2表征提取物，包含色譜峰保留時間為 14.89～15.67min、30.74～31.35min、34.36～34.98min、37.03～37.64min、 39.47～40.01min的5個成分；

所述的高效液相色譜條件1為：ZORBAX?SB-C18柱；流動相：A：乙腈， B：0.05％磷酸水溶液，線性梯度洗脫，0min：27％A；40min：27％A；60min：35％A； 80min：45％A；90min：65％A；100min：75％A；110min：85％A；120min：100％A； 128min：100％A；流速：1.0mL·min-1；檢測波長：254nm；柱溫：30℃；

所述的高效液相色譜條件2為：ZORBAX?SB-C18柱(4.6mm×250mm， 5μm)；流動相：A：乙腈，B：0.05％磷酸水溶液，線性梯度洗脫，0min：60％A；25 min：90％A；40min：100％A；45min：100％A；流速：1.0mL·min-1；檢測波長： 240nm；柱溫：30℃；

該具有抗腫瘤活性的靈芝子實體提取物是指采用以下方法制備得到的 提取物：

(1)靈芝子實體粉碎成粗粉，過篩；

(2)將靈芝子實體粗粉以乙醇為夾帶劑用超臨界CO₂萃取技術進行萃取， 得到靈芝子實體粗提物乙醇溶液，減壓回收溶劑，得到靈芝子實體粗提物；

(3)將靈芝子實體粗提物用醋酸乙酯溶解，飽和碳酸氫鈉溶液萃取，分別 得到飽和碳酸氫鈉層和醋酸乙酯層；

(4)取醋酸乙酯層減壓回收溶劑，真空干燥，得靈芝子實體抗腫瘤提取物。

2.一種權利要求1所述的具有抗腫瘤活性的靈芝子實體提取物的制備 方法，其特征在于，步驟如下：

(1)靈芝子實體粉碎成粗粉，過篩；

(2)將靈芝子實體粗粉以乙醇為夾帶劑用超臨界CO₂萃取技術進行萃取， 得到靈芝子實體粗提物乙醇溶液，減壓回收溶劑，得到靈芝子實體粗提物；

(3)將靈芝子實體粗提物用醋酸乙酯溶解，飽和碳酸氫鈉溶液萃取，分別 得到飽和碳酸氫鈉層和醋酸乙酯層；

(4)取醋酸乙酯層減壓回收溶劑，真空干燥，得靈芝子實體抗腫瘤提取物。

3.根據權利要求2所述的具有抗腫瘤活性的靈芝子實體提取物的制備 方法，其特征在于，

在所述步驟(1)中，靈芝子實體粉碎時，過10～50目篩；

在所述步驟(2)中，超臨界CO2萃取條件為：萃取壓力為25MPa，萃取 溫度為45℃，萃取時間為1.5h，夾帶劑乙醇用量為3mL·g^-1生藥；靈芝子 實體粗提物乙醇溶液回收乙醇時，溫度控制在30～60℃；

在所述步驟(3)中，用醋酸乙酯溶解時，靈芝子實體粗提物與醋酸乙酯兩 者的比例為靈芝子實體粗提物質量(g)∶醋酸乙酯(mL)＝1∶10～1∶100；

在所述步驟(3)中，用飽和碳酸氫鈉溶液萃取醋酸乙酯時，萃取次數為1～8 次；

在所述步驟(3)中，用飽和碳酸氫鈉溶液萃取醋酸乙酯時，醋酸乙酯與飽 和碳酸氫鈉溶液體積比為醋酸乙酯∶飽和碳酸氫鈉溶液＝1∶3～3∶1；

在所述步驟(3)中，用飽和碳酸氫鈉溶液萃取醋酸乙酯時，萃取次數為1～8 次。