[發(fā)明專利]人工活體冷凍提取組織超微結構及其蛋白分布標本的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910012016.3
• 申請日: 2009-06-15
• 公開（公告）號: CN101919715A
• 公開（公告）日: 2010-12-22
• 發(fā)明（設計）人: 李子龍
• 申請（專利權）人: 李子龍
• 主分類號: A61B10/02
• 分類號: A61B10/02
• 代理公司: 沈陽亞泰專利商標代理有限公司 21107
• 代理人: 史旭泰

1.人工活體冷凍提取組織超微結構及其蛋白分布標本的方法，其特征在于采用如下步驟：

(1)、在待取標本活體狀態(tài)下，人工迅速將異戊烷-丙烷混合冷凍劑，直接傾倒在提取標本的活體器官表面上；

(2)、然后將液態(tài)氮浸泡在標本表面，并在液態(tài)氮中手工修剪組織結構標本；

(3)、將提取后的組織結構標本置入多聚甲醛和制備原料純度為99.5-99.7％丙酮，經過提純的冷凍置換液中；同時，用棉絮狀固態(tài)二氧化碳結合丙酮進行保溫，在-80℃環(huán)境下進行緩慢冷凍置換48-72小時，并維持冷凍置換溫度恒定；然后階梯升溫，冷凍置換過程緩慢持續(xù)地進行；

(4)、冷凍置換過程數次重復進行，直至標本組織細胞的水分子全部置換完為止。

2.根據權利要求1人工活體冷凍提取組織超微結構及其蛋白分布標本的方法，其特征在于冷凍置換液的制備過程：多聚甲醛和丙酮混合液需先在60-70℃條件下溶解多聚甲醛于雙蒸水中制成20％多聚甲醛溶液，然后用純度為99.5-99.7％丙酮稀釋；為達到冷凍置換液的高純度，吸出置換液中殘留水分子，需在其中加入分子篩吸收水分子，并進行分子篩更換，直到冷凍置換液中無水分子存在為止，制成多聚甲醛和丙酮混合的冷凍置換液，其中多聚甲醛的終濃度達到2％。

3.根據權利要求1人工活體冷凍提取組織超微結構及其蛋白分布標本的方法，其特征在于采用增加更換冷凍置換液次數的方法，完全置換出組織細胞中的水分子。

4.根據權利要求1或2人工活體冷凍提取組織超微結構及其蛋白分布標本的方法，其特征在于采用純度為99.5-99.7％的丙酮，需分別更換3-6次分子篩來吸收水分子。