[發明專利]一株兼性厭氧海洋施氏假單胞菌的活性提取物及其制法和用途

無效

• 申請號: 200910010499.3
• 申請日: 2009-02-26
• 公開（公告）號: CN101496820A
• 公開（公告）日: 2009-08-05
• 發明（設計）人: 穆軍;顧曉潔;張翼;付步飛;董學偉
• 申請（專利權）人: 大連交通大學
• 主分類號: A61K35/74
• 分類號: A61K35/74;A61P31/04;C12P1/04
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責任公司
• 代理人: 賈漢生

技術領域

本發明涉及來源于細菌的醫藥配制品，特別是來源于一株兼性厭氧海洋反 硝化細菌培養物的活性提取物及其制法。

背景技術

海洋微生物來源的新藥開發是二十一世紀世界范圍的研究熱點問題，以其 新菌種來源、產生新結構活性物質、克服傳統抗生素耐藥性以及實現資源可持 續等特點而為人們所普遍關注。目前已經從各類海洋微生物中分離到許多結構 新穎的抗細菌抗生素、抗真菌抗生素、抗病毒抗生素、抗腫瘤抗生素以及一些 抗炎癥和鎮痛的活性物質、酶抑制劑等。但目前新型生命活性物質的研發對象 主要集中于易于研究的海洋好氧微生物，有大量報道從海洋好氧微生物中分離 到新的藥理活性成分。由于海水的物理阻隔作用，中下層海水中存在大量的兼 性厭氧細菌和嚴格厭氧細菌，至今稀見有從這些類型細菌中分離到活性成分的 報道。海水中的反硝化細菌屬于兼性厭氧的細菌類群，這類微生物在好氧培養 條件下進行有氧呼吸，在缺氧培養條件下進行硝酸鹽呼吸，在其硝酸鹽呼吸代 謝途徑中產生了許多不同于有氧呼吸的次級代謝產物，但迄今尚未見有報道從 海洋反硝化細菌類群在缺氧培養物中分離提取到具有藥理活性的組分。

發明內容

本發明的目的在于提供一種反硝化細菌海洋菌株培養液的活性提取物。

本發明的另一個目的是提供了該活性提取物的分離方法。

本發明進一步的目的是提供了該活性提取物在制備抗細菌藥物中的應用。

本發明涉及的一株兼性厭氧海洋細菌DN7是從中國渤海海域的海洋底泥 中分離獲得。該菌株合適的生長鹽濃度范圍為2.0%～5.0%；對銅綠假單胞菌和 枯草芽孢桿菌有抗性。依據《Bergy’s?manual?of?systematical?bacteriology》(vol.1. The?Williams?and?wilkins?Co.Baltimore.1984),經鑒定為施氏假單胞菌 Pseudomonas?stuszeri，已于2008年10月30日保藏在中國微生物菌種保藏管 理委員會普通微生物中心（其簡稱為CGMCC），保藏單位地址：北京市朝陽 區大屯路，中國科學院微生物研究所。保藏編號為：CGMCC?No.2732。

海洋菌株DN7具有下述性質：革蘭染色為陰性菌。短桿狀，寬 0.3μm～0.5μm，長1.0μm～1.5μm，無鞭毛。在有氧培養條件下進行氧呼吸，菌 落為褐色，表面光滑，較粘稠，邊緣規則；在缺氧培養條件下進行硝酸鹽呼吸， 產氣，每一菌落將包圍的營養瓊脂脹裂，液體培養基中則產生連續而均勻的細 小氣泡。最佳生長溫度范圍35～37℃，最佳生長pH為7.2～7.4。對有機碳源的 利用情況如下：在（1）乙酸鹽，（2）酒石酸鉀鈉,（3）淀粉等條件下生長良好。 海洋菌株DN7在缺氧培養條件下可產生抗菌活性物質，而在有氧培養條件下 則檢測不到抗菌活性物質的產生。

海洋菌株DN7的16S?rDNA序列（1451bp）已向美國國家生物技術信息中心 （NCBI）的GenBank基因序列數據庫提交，登陸號為EU873348。其全序列如下：