[發(fā)明專利]一種柳穿魚黃酮及其總黃酮的制備方法和用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910010324.2
• 申請日: 2009-02-09
• 公開（公告）號: CN101475619A
• 公開（公告）日: 2009-07-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉曉秋;華會明;關(guān)宏峰;蘭洲
• 申請（專利權(quán)）人: 沈陽藥科大學(xué)
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07D311/30;C07D311/40;A61K31/7048;A61K31/352;A61K36/80;A61P9/00;A61P11/14;A61P11/06
• 代理公司: 沈陽杰克知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 李宇彤

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種柳穿魚黃酮及其總黃酮的制備方 法和用途，具體地說是涉及一種來源于柳穿魚藥材的總黃酮和多種黃酮制 備方法及其在制備治療心血管疾病、咳嗽及哮喘藥物中的用途。

背景技術(shù)

柳穿魚為玄參科(Scrophulariaceae)柳穿魚屬(Linaria)植物柳穿魚 Linaria?vulgaris?ssp.sinensis(Bebeaux)Hong的干燥全草。其原產(chǎn)歐亞大陸北 部溫帶，生沙地、山坡草地及路邊。喜光，較耐寒，不耐酷熱，宜中等肥 沃、適當(dāng)濕潤而又排水良好的土壤。

國外民間用柳穿魚屬植物作利尿劑、輕瀉劑、解痙、利膽和抗炎藥， 用于治療膀胱炎、出血、皮疹等[Handjieva?NV，et?al.Iridoid?glycosides?from Linaria?species.Tetrahedron，1993，49(41)：9261-9266]。柳穿魚藥材主要 含有黃酮類成分，未見有關(guān)柳穿魚黃酮及總黃酮制備方法及其用于制備治 療心血管疾病，緩解咳嗽及哮喘藥物的報道。本發(fā)明提供了簡便快速、造 價低廉且適合工業(yè)化大生產(chǎn)的制備柳穿魚總黃酮和高純度單體黃酮的方法 及總黃酮在心血管疾病方面的用途。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的之一在于提供一種來源于柳穿魚的黃酮及總黃酮。

本發(fā)明的目的之二在于提供所述柳穿魚黃酮及總黃酮的制備方法。

本發(fā)明的目的之三在于提供所述柳穿魚黃酮及總黃酮的用途。

本發(fā)明提供的柳穿魚的總黃酮類，是從柳穿魚藥材中提取的，其總黃 酮的含量在60％以上。其中主要以柳穿魚苷為主，含量在20％以上，還包 括柳穿魚苷、柳穿魚苷元、橙皮苷和刺槐素等。

其柳穿魚黃酮和總黃酮的制備方法如下：

1)預(yù)處理：將采收后的柳穿魚藥材曬干后切段，得到的柳穿魚生藥 備用；

2)提取：加入5～12倍生藥量的50～90％的提取溶劑進行回流提取 1～4次，每次提取時間為0.5～3h，濾過，合并濾液；或加入5～10倍生藥 量的50～90％的提取溶劑冷浸12h～48h，濾過，合并濾液；或加入5～10 倍量的50～90％的提取溶劑浸潤4～24小時，使藥材粗粉充分膨脹，分次 均勻地裝入底部墊有脫脂棉的滲漉器中，每次裝好后用木棒壓緊，上面蓋 上紗布，并壓上一層洗凈的小石子，以免加入提取溶劑后使藥粉浮起。然 后打開滲濾器下口的開關(guān)，再慢慢地從滲漉器上部加進提取溶劑，當(dāng)液體 自下口流出時關(guān)閉上口開關(guān)，加蓋，打開下口開關(guān)，使?jié)B漉液緩緩流出， 滲漉速度為2～5ml/min，收集滲漉液，過濾，合并濾液。所述的提取溶劑為 甲醇、乙醇或丙酮。

3)濃縮：將步驟2)得到的濾液濃縮干燥，得到柳穿魚提取浸膏。

4)上柱：將步驟3)得到的浸膏以0.3～0.5g/ml上樣于AB-8或 HPD-600或D101型大孔樹脂，上樣流速為1～3BV/h，分別采用柱徑高比 為1∶3～1∶7的大孔吸附樹脂，上樣濃度為0.3～0.5g/ml，用30％～90％的 濃度乙醇溶液進行洗脫。

5)制備：將收集到的乙醇濃度為90％洗脫液過濾，合并濾液，濃縮 干燥，得到柳穿魚的總黃酮提取物。

6)將步驟4)得到的不同乙醇洗脫部分經(jīng)硅膠色譜柱、聚酰胺色譜柱 或凝膠色譜柱，用三氯甲烷或二氯甲烷或甲醇或乙醇或水或它們之間的不 同比例的組合洗脫，分別得到橙皮苷、柳穿魚苷、柳穿魚苷元和刺槐素等 不同的黃酮單體化合物。

其中所述步驟2)的提取溶劑為乙醇；提取方式為回流。回流提取方 法是以90％乙醇提取3次。每次提取時間為1.5h。所述步驟4)的大孔樹 脂柱為HPD-600型樹脂，上樣濃度為0.5g/ml，流速為3BV/h，柱徑高比 為1∶5，乙醇濃度為30％、50％和90％。

將步驟4)中得到的30％乙醇洗脫部分流經(jīng)聚酰胺柱色譜，用二氯甲 烷∶甲醇(30∶1)進行洗脫，洗脫液進行過濾，合并濾液，濃縮干燥， 得到橙皮苷，純度在95％以上。

將步驟4)中得到的50％乙醇洗脫部分流經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜，用二氯 甲烷∶甲醇(10∶1)進行洗脫，合并洗脫部分，得到的洗脫部分再經(jīng)過 Sephadex?LH-20柱色譜，用甲醇進行洗脫，洗脫液進行過濾，合并濾液， 濃縮干燥，得到柳穿魚苷，純度在95％以上。