[發明專利]一種使孢子快速萌發的方法無效
| 申請號： | 200910009352.2 | 申請日： | 2009-02-20 |
| 公開（公告）號： | CN101760434A | 公開（公告）日： | 2010-06-30 |
| 發明（設計）人： | 張新春 | 申請（專利權）人： | 張新春 |
| 主分類號： | C12N1/14 | 分類號： | C12N1/14;C12N3/00;C12R1/645 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 571737 海南省*** | 國省代碼： | 海南;66 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 孢子 快速 萌發 方法 | ||
1.一種使孢子快速萌發的方法，包括以下步驟：
A、取孢子菌株在PDA培養基上置于培養箱內進行單孢培養，待菌絲長滿皿后，置于光照下連續照射至少4天，誘導孢子的產生；
B、用適當量的無菌水沖洗菌落表面，得到孢子液，孢子液經過過濾得到孢子懸浮液，然后用無菌水稀釋，使孢子濃度達到105個/ml；
C、取配置好的孢子懸浮液進行懸滴法和載玻片萌發法操作；
D、把從步驟B得到的部分孢子懸浮液離心，保留部分上清約，備用；
E、無菌條件下，把滅過菌的孔徑為0.45um的透明微孔濾膜平鋪在事先準備好的PDA平板上，使膜與培養基表面緊密接觸，不留空隙；
F、取步驟D離心得到的孢子懸浮液平鋪到濾膜上，用三角玻棒攤勻，用封口膜封口后置于28℃培養箱培養。
2.根據權利要求1所述的一種使孢子快速萌發的方法，其特征在于，還包括步驟G、在顯微鏡下直接觀察孢子的萌發率。
3.根據權利要求1所述的一種使孢子快速萌發的方法，其特征在于，還包括步驟G、用無菌水沖洗萌發的孢子，得到萌發的孢子懸浮液，觀察孢子懸浮液得到萌發率。
4.根據權利要求1-3任意一項所述的一種使孢子快速萌發的方法，其特征在于，保留部分上清約100ul。
5.根據權利要求1-3任意一項所述的一種使孢子快速萌發的方法，其特征在于，培養箱的溫度28±0.5℃。
6.根據權利要求1-3任意一項所述的一種使孢子快速萌發的方法，其特征在于，光照的溫度控制在28±0.5℃范圍內。
7.根據權利要求1所述的一種使孢子快速萌發的方法，其特征在于，步驟C采用的懸滴法和載玻片萌發法參照方中達《植病研究方法》。
8.根據權利要求1所述的一種使孢子快速萌發的方法，其特征在于，步驟E中，膜的大小以剛能全部遮住培養基為準。
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