[發明專利]編碼β-半乳糖苷酶的基因及其表達和應用

無效

• 申請號: 200910001928.0
• 申請日: 2009-01-14
• 公開（公告）號: CN101597614A
• 公開（公告）日: 2009-12-09
• 發明（設計）人: 張偉;姚斌;伍寧豐;范云六;郭軍;張宇宏
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院生物技術研究所
• 主分類號: C12N15/56
• 分類號: C12N15/56;C12N9/38;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 孫皓晨;費碧華

1、一種編碼β-半乳糖苷酶的基因，該基因選自(a)、(b)、(c)或(d)所示的核苷酸序列：

(a)SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列；或

(b)在嚴謹條件下能與(a)所示的核苷酸序列的互補序列雜交的核苷酸序列，且該核苷酸序列編碼具有β-半乳糖苷酶活性的蛋白；或

(c)編碼SEQ?ID?NO：2所示氨基酸序列的核苷酸序列；或

(d)編碼具有β-半乳糖苷酶功能的蛋白衍生物的核苷酸序列，該蛋白衍生物通過將SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列的一個或多個氨基酸殘基替換、缺失或插入而獲得。

2、按照權利要求1所述的基因，其特征在于：該基因的核苷酸序列為SEQ?ID?NO：1所示。

3、一種β-半乳糖苷酶，其特征在于選自以下(a)或(b)所示的氨基酸序列：

(a)SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列；或

(b)將SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列通過一個或多個氨基酸殘基的替換、缺失或插入而獲得的仍具有β-半乳糖苷酶活性的蛋白衍生物。

4.根據權利要求3的β-半乳糖苷酶，其特征在于：其是SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列。

5.含有權利要求1或2所述基因的重組表達質粒。

6.按照權利要求5的重組表達質粒，其特征是所述的重組表達質粒是pET-galc。

7.含有權利要求5或6所述重組表達質粒的重組菌株。

8、一種制備權利要求3所述β-半乳糖苷酶的方法，包括以下步驟：

構建含有SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列的重組表達質粒；用該重組表達質粒轉化宿主細胞，得重組菌株；培養該重組菌株，誘導重組β-半乳糖苷酶的表達，回收并純化所表達的β-半乳糖苷酶。

9.按照權利要求8的方法，其特征是所述的重組表達質粒是pET-galc；所述的宿主細胞是大腸桿菌(Escherichia?coli)BL21。