[發明專利]用于在原核生物中生產蛋白質的TAT信號肽無效
| 申請號: | 200880020335.2 | 申請日: | 2008-06-02 |
| 公開(公告)號: | CN101679958A | 公開(公告)日: | 2010-03-24 |
| 發明(設計)人: | 鮑鍇;費爾南多·瓦耳 | 申請(專利權)人: | 丹尼斯科美國公司 |
| 主分類號: | C12N9/16 | 分類號: | C12N9/16;C12N15/62;C12N15/73;C12P21/02 |
| 代理公司: | 北京市中咨律師事務所 | 代理人: | 黃革生;林柏楠 |
| 地址: | 美國加利*** | 國省代碼: | 美國;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 用于 生物 生產 蛋白質 tat 信號肽 | ||
1、分離的多核苷酸,其包含可操作地連接的第一核酸序列和第二核酸 序列,所述第一核酸序列編碼TAT信號肽,所述第二核酸序列編碼分類為 EC?3.1.8蛋白質的磷酸三酯水解酶。
2、權利要求1的分離的多核苷酸,其中所述TAT信號肽包含選自SEQ ID?NO:1-5的氨基酸序列。
3、權利要求1的分離的多核苷酸,其中所述水解酶是有機磷水解酶 (OPH)。
4、權利要求1的分離的多核苷酸,其中所述水解酶是SEQ?ID?NO:18 的有機磷水解酶(OPH),或其變體。
5、權利要求1的分離的多核苷酸,其中編碼所述水解酶的所述第二核 酸經過優化,用于在鏈霉菌屬宿主細胞中表達所述水解酶。
6、權利要求1的分離的多核苷酸,其中所述分離的多核苷酸可操作地 連接SEQ?ID?NO:23的A4啟動子。
7、包含權利要求1的分離的多核苷酸的表達載體。
8、包含權利要求7的表達載體的分離的宿主細胞。
9、權利要求8的分離的宿主細胞,其中所述宿主細胞是鏈霉菌屬宿主 細胞。
10、分離的融合多肽,其包含與SEQ?ID?NO:18的有機磷水解酶或其 變體連接的TAT2或TAT3信號肽。
11、權利要求10的分離的融合多肽,其中所述TAT信號肽選自SEQ ID?NO:1或5。
12、生產有機磷降解酶的方法,包括:
(a)在宿主細胞中表達權利要求1的多核苷酸;和
(b)生產所述酶。
13、權利要求12的方法,其中回收所述宿主細胞產生的所述酶。
14、權利要求12的方法,其中所述宿主細胞是鏈霉菌屬宿主細胞。
15、權利要求12的方法,其中所述酶是有機磷水解酶。
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