[發(fā)明專利]用一類基于與組氨酸結(jié)合生成熒光基團的銥配合物標記抗體

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810242798.5
• 申請日: 2008-12-19
• 公開（公告）號: CN101750486A
• 公開（公告）日: 2010-06-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 費浩;周明;賈俊麗;王小波;黃澤柱
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州納凱科技有限公司
• 主分類號: G01N33/533
• 分類號: G01N33/533;C07K2/00;C07K16/00
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1.一種新型生物標記方法，該方法使用一類由兩個相同的C^N二齒配體以及兩個溶劑分子配位絡(luò)合的環(huán)金屬銥配位化合物標記抗體、多肽和蛋白質(zhì)，被標記對象的氨基酸序列中至少含有一個組氨酸殘基。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的環(huán)金屬銥配位化合物具有如下的化學分子式：(L_C^N)₂Ir(L_solv)₂[OTf]其結(jié)構(gòu)為：

其中，L_C^N代表C^N二齒配體，L_solv代表溶劑分子，OTf代表三氟甲基磺酸根。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的環(huán)金屬銥配位化合物中的C^N二齒配體L_C^N包括但不局限于2-苯基吡啶、1-苯基異喹啉、2-苯基苯并噻吩、苯并喹啉、4-甲基苯基吡啶、4，6-二氟苯基吡啶、2-(苯并噻吩)吡啶、2-苯基喹啉和2，5-二苯基惡唑。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的環(huán)金屬銥配位化合物中的溶劑分子包括但不限于水、乙腈、DMF和DMSO。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的環(huán)金屬銥配位化合物用于熒光標記的抗體分子，包括但不局限于天然純化獲得的抗體、體外重組表達的抗體、各類抗體亞型(IgG，IgM，IgA，IgD，IgE等)、來源于各類物種的抗體分子(人，小鼠，大鼠，羊，兔，雞，馬，驢，荷蘭豬，駱駝等)、多克隆抗體、單克隆抗體、Fab片段、Fab’片段和Fc片段。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的環(huán)金屬銥配位化合物用于熒光標記的多肽和蛋白質(zhì)，包括但不局限于人工合成多肽、體外重組表達多肽、生物體內(nèi)提純多肽、人工合成蛋白質(zhì)、體外重組表達蛋白質(zhì)、生物體內(nèi)提純蛋白質(zhì)、含天然分子序列的多肽或蛋白質(zhì)、含人工設(shè)計序列的多肽或蛋白質(zhì)、多肽類藥物制劑和蛋白質(zhì)類藥物制劑等。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的多肽是指含有n個氨基酸殘基的由酰胺鍵構(gòu)成主鏈結(jié)構(gòu)的鏈狀分子(2≤n≤50)。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的環(huán)金屬銥配位化合物用于標記生物活性分子的過程中使用常規(guī)緩沖液體系，包括但不局限于磷酸緩沖液(PBS)、Tris緩沖液、Bis-Tris緩沖液、MES緩沖液和HEPES緩沖液。

9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的標記后的抗體分子用于基于免疫方法的生物檢測，包括但不局限于基于光致發(fā)光的免疫分析(酶聯(lián)免疫分析，如雙抗體夾心法、間接法、間接雙抗體夾心法、抗原直接包被法，時間分辨熒光免疫分析(Time-resolved?Fluorescence)，熒光能量共振轉(zhuǎn)移免疫分析(Resonance?Energy?Transfer))、基于電化學發(fā)光(Electrochemiluminescence)的免疫分析方法、細胞及組織切片免疫染色(標記一抗用于免疫染色、標記二抗用于免疫染色、多重染色)和免疫分子印跡等。

10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的標記后的多肽和蛋白質(zhì)進一步用于生物醫(yī)學樣品標記、核酸或多肽藥物組裝，包括但不局限于體內(nèi)(in?vivo)或體外(in?vitro)的生物檢測、細胞染色、動物組織標記和藥物組裝與標記等實驗。