[發(fā)明專利]自動(dòng)物樣品中提取喹諾酮類和磺胺類化合物的方法及其專用免疫親和吸附劑

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810239225.7
• 申請(qǐng)日: 2008-12-04
• 公開（公告）號(hào): CN101455958A
• 公開（公告）日: 2009-06-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 沈建忠;李存;張素霞;史為民;萬宇平;江海洋;曹興元;馮才偉;李建成;王戰(zhàn)輝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): B01J20/281
• 分類號(hào): B01J20/281;C07D215/56;C07D261/16
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 關(guān) 暢;任鳳華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種自動(dòng)物樣品中提取喹諾酮類和磺胺類化合物的方法及其專用免疫親和吸附劑。

背景技術(shù)

隨著生命科學(xué)的發(fā)展，人們對(duì)生物體內(nèi)的物質(zhì)及其變化產(chǎn)生了越來越濃厚的興趣，而生物樣本的分析就成為探索和發(fā)現(xiàn)生命奧秘的必要手段。由于生物樣本成分復(fù)雜，待測(cè)物濃度較低，而且大多數(shù)取樣量很少，這就對(duì)分析方法的選擇性和靈敏度提出了更高的要求。免疫親和色譜(IAC，Immunoaffinity?chromatography)是一種將免疫反應(yīng)與色譜分析方法相結(jié)合的分析方法。它的高度選擇性和高親和性無疑使分析過程簡(jiǎn)化。在獸藥殘留分析中，IAC最簡(jiǎn)單而且最有效的應(yīng)用方式是作為理化測(cè)定技術(shù)(如HPLC，GC)的樣品凈化手段，這種聯(lián)用方法可使免疫學(xué)技術(shù)和理化技術(shù)在選擇性、分離能力、速度和靈敏度方面得到互補(bǔ)，并避免了免疫分析法(如ELISA，RIA)直接測(cè)定樣品的諸多不足。目前，該方法在抗體、激素、多肽、酶、重組蛋白、受體病毒及小分子化合物的分析中被廣泛應(yīng)用。

喹諾酮類(Quinolones，QNs)是一類人工合成的廣譜殺菌性抗菌藥物，因其抗菌譜廣、抗菌活性強(qiáng)、與其他抗菌藥物無交叉耐藥性等特點(diǎn)而廣泛應(yīng)用于動(dòng)物和人類的多種感染性疾病的預(yù)防和治療。但過量或不當(dāng)使用會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物性產(chǎn)品中喹諾酮類藥物殘留，除其本身的毒副作用對(duì)人體造成直接危害外，更為嚴(yán)重的是人類長(zhǎng)期食用含較低濃度喹諾酮類藥物的動(dòng)物性食品，容易誘導(dǎo)耐藥性的傳遞，從而影響該類藥物的臨床療效。因此，喹諾酮類藥物殘留問題越來越引起人們的關(guān)注。我國(guó)農(nóng)業(yè)部、歐盟、美國(guó)等都制定了該類藥物在各種動(dòng)物性食品中的最高殘留限量(MRL)。

磺胺類藥物(Sulfonamides，SAs)屬都是以對(duì)氨基苯磺酰胺為基本結(jié)構(gòu)的衍生物。磺胺類藥物其抗菌譜廣，毒性小、口服易吸收、生產(chǎn)量大，價(jià)格低廉，供應(yīng)充足，抑菌效果強(qiáng)，廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)。但由于不合理使用甚至濫用獸藥，造成磺胺類藥物于動(dòng)物性食品中殘留現(xiàn)象較為嚴(yán)重，極大地影響了人們的健康，也影響我國(guó)畜產(chǎn)品的正常出口貿(mào)易，發(fā)展獸藥殘留監(jiān)控和檢測(cè)技術(shù)，有利于保障人民健康，促進(jìn)畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和正常的畜禽產(chǎn)品的國(guó)際貿(mào)易。

近幾十年來，各學(xué)者針對(duì)食品和飼料中磺胺類藥物的殘留分析進(jìn)行了深入全面的研究。其化學(xué)檢測(cè)方法包括薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、氣譜-質(zhì)譜聯(lián)機(jī)(GC/MS)、高壓液相色譜法(HPLC)、高壓液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)機(jī)(HPLC/MS)等。喹諾酮類藥物在動(dòng)物組織中的殘留分析方法主要有酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)，高效液相色譜法(HPLC)，液相色譜—質(zhì)譜分析法(LC-MS)。這些方法的前處理利用液—液分配，常規(guī)的SPE柱凈化和分離，都在不同程度地存在著處理過程繁瑣、凈化效果差、有機(jī)溶劑浪費(fèi)多、所需時(shí)間長(zhǎng)等缺點(diǎn)。免疫親和技術(shù)是90年代在分析領(lǐng)域得到應(yīng)用的新技術(shù)，但用免疫親和柱同時(shí)凈化基質(zhì)中的喹諾酮類藥物和磺胺類藥物未見報(bào)道，更無商品化的IAC柱出售。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種能自動(dòng)物樣品中提取如下13種喹諾酮類化合物中的至少一種(Quinolones，QNs)和/或6種磺胺類化合物(Sulfonamides，SAs)中的至少一種的方法及其專用免疫親和吸附劑。所述13種喹諾酮類化合物(Quinolones，QNs)為喹諾酮類的環(huán)丙沙星(Ciprofloxacin，CIP)、諾氟沙星(Norfloxacin，NOR)、培氟沙星(Pefloxacin，PEF)、氧氟沙星(Ofloxacin，OFL)、依諾沙星(Enoxacin，ENO)、麻保沙星(Marbofloxacin，MAR)、洛美沙星(Lomefloxacin，LOM)、單諾沙星(Danofloxacin，DAN)、恩諾沙星(Enrofloxacin，ENR)、沙拉沙星(Sarfloxacin，SAR)、二氟沙星(Difloxacin，DIF)、噁喹酸(Oxolinic?acid，OXO)和氟甲喹(Flumequine，F(xiàn)LU)；所述6種磺胺類化合物(Sulfonamides，SAs)為磺胺嘧啶(Sulfadimidine，SD)、磺胺噻唑(Sulfathiazole，ST)、磺胺吡啶(Sulfapyridine，SP)、磺胺甲噻二唑(Sulfamethizole，SMT)、磺胺間甲氧嘧啶(Sulfamonomethoxine，SMM)和磺胺甲噁唑(Sulfamethoxazole，SMZ)。