[發明專利]產二十碳五烯酸油脂的腐霉及該油脂的發酵制備方法有效
| 申請號： | 200810236810.1 | 申請日： | 2008-12-10 |
| 公開（公告）號： | CN101434908A | 公開（公告）日： | 2009-05-20 |
| 發明（設計）人： | 余龍江;盧美歡;范志永;朱敏;周蓬蓬 | 申請（專利權）人： | 華中科技大學 |
| 主分類號： | C12N1/14 | 分類號： | C12N1/14;C12P7/64;C12R1/645 |
| 代理公司： | 華中科技大學專利中心 | 代理人： | 曹葆青 |
| 地址： | 430074湖北*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 產二十碳五烯酸 油脂 發酵 制備 方法 | ||
1.產二十碳五烯酸油脂的腐霉(Pythium?sp.)HUST-RBB12?CCTCCNo.M208247。
2.一種二十碳五烯酸油脂的發酵制備方法，將權利要求1所述的腐霉進行菌種活化培養，將菌種的孢子懸液進行種子培養，再將得到的種子培養液進行發酵培養，收獲濕菌體，烘干研磨，從中提取油脂。
3.根據權利要求2所述的發酵制備方法，其特征在于：
(1)將所述的腐霉進行12-48小時的菌種活化培養；
(2)將菌種的孢子懸液接入種子培養基進行24-72小時培養，得到種子培養液；
(3)將種子培養液轉接到搖瓶培養基中，進行第一階段搖瓶發酵培養4-8天，或轉接到10L發酵罐進行第一階段發酵罐培養4-8天；
(4)再進行3-10天第二階段發酵培養，收獲濕菌體，并在50℃-90℃溫度進行烘干，然后研磨，從中提取油脂。
4.根據權利要求3所述的發酵制備方法，其特征在于：第二階段搖瓶或第二階段10L發酵罐發酵培養過程為：向第一階段發酵培養4-8天后的發酵液中，加入下列物質：乙醇20-120g/L，硝酸鉀1.0-6.0g/L，氯化鈣0.2-2.0g/L、pH?4.0-7.5；培養條件：溫度0-18℃，時間3-10天，搖床轉速或發酵罐攪拌轉速：0-100rpm。
5.根據權利要求3所述的發酵制備方法，其特征在于：步驟(4)中，油脂的提取方法：將低溫發酵結束后的發酵液進行抽濾，收集濕菌體，50℃-90℃烘干，然后仔細研磨，再用石油醚萃取兩次，每克干菌體用5-10ml石油醚萃取，每次3-6小時，減壓回收石油醚得到含EPA的油脂。
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