[發明專利]一種采集、回收痕量DNA的試劑及試劑盒和應用方法

無效

• 申請號: 200810233535.8
• 申請日: 2008-11-06
• 公開（公告）號: CN101397588A
• 公開（公告）日: 2009-04-01
• 發明（設計）人: 羅瑛;柳海濤;唐文如;李安;史斌
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 昆明正原專利代理有限責任公司
• 代理人: 金耀生

技術領域

本發明涉及法醫物證生物學、人類學、刑偵學等領域的個體識別、親子鑒定等DNA檢 測、鑒定技術，具體地說是一種采集、回收痕量DNA的試劑及含有該試劑的試劑盒和應用 方法。

背景技術

在法醫偵檢工作中，犯罪現場的法醫學物證的鑒定和檢出，對于及時有效地指證犯罪 分子，打擊犯罪起到至關重要的作用。

在實際案例中，嫌疑人或事件責任人往往在現場遺留有汗潛指紋。以往對現場指紋一 直從形態學線條特征進行比對達到個體認定的目的，隨著作案手段的日趨多樣化、復雜化， 單純依靠形態學線條特征認定個體已經不能滿足案件偵破的需要。DNA檢測技術的發展， 為汗潛指紋的DNA檢驗鑒定提供了條件，利用高科技生物技術檢出犯罪現場的痕量殘留 DNA，可為找出或指證犯罪嫌疑人提供科學依據。

短串聯重復序列(short?tandem?repeat，STR)是廣泛存在于人類基因組中的一類具有 長度多態性的DNA序列.它由2～6個堿基對構成核心序列，呈串聯重復排列，其長度多態性 主要由核心序列拷貝數目的變化而產生。一般認為，人類基因組平均每6～10kb就有1個 STR基因座，不同STR基因座的組合產生了極為豐富的基因座圖譜信息，為法醫物證學中的 個人識別和親子鑒定提供了基礎。STR-DNA分型技術的科學性和實用性也得到廣大司法部 門和社會各界的一致認可和高度重視，從而在各類案件和事件的調查中發揮其作用。

然而，由于犯罪現場的DNA殘留量甚微，痕量法醫物證DNA采集、回收率低是導致 后續的DNA檢出率低，STR分型失敗，不能指認犯罪個體的主要原因。

目前，已有大量研究和文獻報道犯罪現場痕量DNA提取與STR分型的案例(步嶸and 王耀平1999；方慧and胡家偉2000；顧麗華，平原et?al.2003；巴華杰，劉冰泉et al.2007；陳榮華，宋清et?al.2007)。其主要的技術包括：

1、采用蒸餾水進行DNA樣品采集。對于汗潛指紋DNA采用二步擦拭法采集DNA。即先用 蘸有蒸餾水的棉條擦拭一次，再用干棉條擦拭一次，將兩次回收的樣品合并用于下面 的DNA提取、純化。

2、采取5％Chelex-100或5％Chelex-100與Microcon-100濃縮柱聯合提取DNA。

3、在STR-DNA擴增條件方面，主要采用Profiler?Plus(美國ABI公司)試劑盒的10ul 擴增體系。

目前的技術在實際應用中，對于水溶性樣本的檢出率較高，如從現場遺留的血痕，體 液痕跡(鄭會芬，董研et?al.2006)，甚至吃剩的食物上可以檢測到罪犯的DNA(張曉紅， 唐建新et?al.2006)，然而對于不同材質上殘留的汗潛指紋的DNA檢測尤為困難(顧麗華， 平原et?al.2003；董研，張晨et?al.2006)。而汗潛指紋則是犯罪現場最常留下的法 醫物證，對這一樣品DNA的成功檢出可以極大地提高法醫物證DNA的檢出率。

前期現場DNA樣品采集技術的限制，大大影響了痕量DNA，特別是汗斑指紋DNA的檢 出效率。

參考文獻：

1、巴華杰，劉冰泉，et?al.(2007).″Chelex-100法提取濾紙血痕DNA影響因素的比較.″法醫學雜志23(5)：347-348.

2、方慧and胡家偉(2000).″用Chelex-100提取骨骼DNA的研究.″刑事技術(2)：16-17.

3、步嶸and王耀平(1999).″以Chelex100為介質抽提DNA.″中華病理學雜志28(5)：379-380.

4、董研，張晨，et?al.(2006).″汗潛指印的str分型檢測在案件中的應用.″法醫學雜志22(1)：74-75.

5、張曉紅，唐建新，et?al.(2006).″Chelex-100法在微量檢材DNA檢驗中的應用2例.″廣東公安科技(3)： 69-70，72.

6、鄭會芬，董研，et?al.(2006).″現場散布血跡dna檢案1例.″法醫學雜志22(2)：129-129.