[發明專利]一種采集、回收痕量DNA的試劑及試劑盒和應用方法無效
| 申請號: | 200810233535.8 | 申請日: | 2008-11-06 |
| 公開(公告)號: | CN101397588A | 公開(公告)日: | 2009-04-01 |
| 發明(設計)人: | 羅瑛;柳海濤;唐文如;李安;史斌 | 申請(專利權)人: | 昆明理工大學 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 昆明正原專利代理有限責任公司 | 代理人: | 金耀生 |
| 地址: | 650093云南*** | 國省代碼: | 云南;53 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 采集 回收 痕量 dna 試劑 試劑盒 應用 方法 | ||
1.一種采集、回收痕量DNA的試劑,其特征在于該試劑主要由pH緩沖體系,鹽離子, 表面活性劑,螯合樹脂,蛋白酶組成,pH緩沖體系為Tris-HCl,鹽離子為MgCl2和KCl 或MgCl2和NaCl,表面活性劑為非離子去污劑NP-40和吐溫20或NP-40和TritonX-100, 鰲合樹脂為Chelex-100,用量配比為:Tris-HCl?10-30mM,pH?8.0,KCl或NaCl?10-50mM, MgCl20.5-2mM,吐溫20或TritonX-1000.2-1%(v/v),NP-400.2-1%(v/v),Chelex-100 5%(w/v),使用前新鮮加入0.4-1mg/ml蛋白酶K。
2.權利要求1所述的采集、回收痕量DNA的試劑,其特征在于用該試劑制成的試劑盒。
3.權利要求1所述的采集、回收痕量DNA的試劑的應用方法,其特征在于按以下步驟進 行:
1)依據采集面積的大小,取10ul-20ul權利要求1所述的采集、回收痕量DNA的試劑 到eppendorf管,取一條棉條放入潤濕,取出棉條,擦拭待采集部位,連棉條一起回收 到eppendorf管中;
2)55℃恒溫箱溫育2-3小時;
3)離心帶棉條的eppendorf管,取1-5ul上清用于后續的DNA擴增等分析技術;
4)-20℃保存剩余的樣品,以備后用。
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