[發明專利]一種篩選畢赤酵母高拷貝數轉化子的方法無效
| 申請號： | 200810230877.4 | 申請日： | 2008-11-14 |
| 公開（公告）號： | CN101649347A | 公開（公告）日： | 2010-02-17 |
| 發明（設計）人： | 張建云;崔樹軍;谷立坤;廉有軒;金維平 | 申請（專利權）人： | 河南工程學院 |
| 主分類號： | C12Q1/04 | 分類號： | C12Q1/04 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 451191河*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 篩選 酵母 拷貝 轉化 方法 | ||
1.一種新型的篩選畢赤酵母高拷貝數轉化子的方法，本發明的特征在于：
(1)自制了一種新型的、特殊的G418斜面濃度梯度篩選平板。
(2)以步驟(1)的得到的G418斜面濃度梯度篩選平板，用于篩選含有高拷貝數外源基因的畢赤酵母轉化子。
2.按照權利要求1中所述的新型的篩選畢赤酵母高拷貝數轉化子的方法的應用。其特征在于篩選中使用了G418的斜面濃度梯度平板。
3.按照權利要求1中所述的新型的快速篩選畢赤酵母高拷貝數轉化子的方法。其特征在于G418的斜面梯度平板制作過程中，上層培養基中使用了不含G418的培養基，下層培養基中使用了含有一定濃度的G418，G418的濃度范圍在0mg/ml到100mg/ml之間。
4.按照權利要求1中所述的新型的快速篩選畢赤酵母高拷貝數轉化子的方法。其特征在于G418的斜面梯度平板制作過程中，下層含有一定濃度G418的培養基在凝固之前制成了斜面平板，其斜面與水平面的傾斜角度在0°到90°之間。
5.按照權利要求1中所述的新型的快速篩選畢赤酵母高拷貝數轉化子的方法。本篩選平板制備過程中所使用的容器不限于90mm培養皿，可以為任何類似的容器。
6.按照權利要求1中所述的新型的快速篩選畢赤酵母高拷貝數轉化子的方法。本篩選方案可適用于任何類型的畢赤酵母的宿主菌(GSII5，KM71，SMD1168，SMD1163)
7.按照權利要求1中所述的新型的快速篩選畢赤酵母高拷貝數轉化子的方法。本篩選方案可適用于任何類型的畢赤酵母的表達載體(PIC9K，PIC3.5K，PIC9)
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