[發明專利]林蛙抗癌肽及其制備方法有效
| 申請號: | 200810230190.0 | 申請日: | 2008-12-26 |
| 公開(公告)號: | CN101445554A | 公開(公告)日: | 2009-06-03 |
| 發明(設計)人: | 尚德靜 | 申請(專利權)人: | 遼寧師范大學 |
| 主分類號: | C07K14/435 | 分類號: | C07K14/435;C07K1/16;C07K1/14;A61K38/17;A61P35/00;A23L1/29 |
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| 地址: | 116029*** | 國省代碼: | 遼寧;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 抗癌 及其 制備 方法 | ||
1.一種林蛙抗癌肽,其特征在于以林蛙皮膚為原料于pH3-5酸化乙醇中浸提,將提取液離心后得上清液,上清液凍干濃縮,溶于蒸餾水中配制成溶液,經凝膠柱層析,1-3M醋酸為洗脫液,280nm檢測波長下,分離得到分子量為1-10kD具有抗癌活性的肽,凍干濃縮為白色粉末,其在pH?3-10范圍內具有活性,pH值為5時活性最強,于0~10℃保存24個月仍有活性。
2.一種制備林蛙抗癌肽方法,其步驟如下:
(1)將林蛙皮加入2-10倍體積的酸化乙醇,于4-20℃浸提24-72小時,其中酸化乙醇為0.5-5M鹽酸與乙醇調至pH值4-5或0.5-5M醋酸與乙醇調至pH值3-4為宜;
(2)提取液在3000-8000rpm下離心10-60分鐘,收集上清液;
(3)對沉淀物重復2-3次步驟1,2;
(4)合并上清液,凍干濃縮;
(5)凍干粉溶于蒸餾水中配成溶液;
(6)上述溶液經Sephadex?G-50凝膠柱層析,4-10℃條件下層析分離,凝膠柱以1-3M醋酸平衡,上樣,1-3M醋酸洗脫,流速為0.1-0.6ml/min,收集洗脫液,每8min收集一管,根據檢測器測得的280nm下的紫外吸收峰合并各組分,收集分子量為1-10kD的活性組分,凝膠柱還可以為Sephadex?G-25或Sephadex?G-75;
(7)活性組分透析脫鹽,凍干濃縮,于-20℃保存,得到林蛙抗癌肽。
3.權利要求1所述的林蛙抗癌肽在制備抗癌藥物或保健食品中的應用。?
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