[發明專利]表達禽流感病毒H9亞型HA蛋白的重組新城疫病毒LaSota弱毒疫苗株

有效

• 申請號: 200810222776.2
• 申請日: 2008-09-24
• 公開（公告）號: CN101376027A
• 公開（公告）日: 2009-03-04
• 發明（設計）人: 步志高;陳化蘭;葛金英
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所
• 主分類號: A61K39/295
• 分類號: A61K39/295;A61K39/17;A61P31/14;A61P31/16;C12N15/45
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司
• 代理人: 吳小明

1.一種表達編碼禽流感病毒H9亞型血凝素蛋白的基因的重組新城疫 LaSota弱毒疫苗，其中用于表達血凝素蛋白的新城疫LaSota弱毒疫苗是 AV1615，所述禽流感病毒H9亞型血凝素蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?No. 1所示。

2.根據權利要求1的重組新城疫LaSota弱毒疫苗，其中所述編碼禽 流感病毒H9亞型血凝素蛋白的基因的序列如SEQ?ID?No.2所示。

3.根據權利要求1或2的重組新城疫LaSota弱毒疫苗在制備預防禽 流感和新城疫的雙價疫苗中的應用。

4.一種生產權利要求1或2的重組新城疫LaSota弱毒疫苗的方法， 該方法包括：

(1)構建轉錄質粒，該轉錄質粒包括其中插入編碼禽流感病毒H9亞 型血凝素蛋白的基因的所述新城疫LaSota弱毒疫苗的基因組cDNA序列；

(2)構建一個或多個轉錄輔助質粒，該輔助質粒包括編碼所述新城疫 LaSota弱毒疫苗的核蛋白的cDNA序列、編碼所述新城疫LaSota弱毒疫 苗的磷酸蛋白的cDNA序列、和編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗的大聚 合酶蛋白的cDNA序列；

(3)將所述轉錄質粒和轉錄輔助質粒共轉染所述新城疫LaSota弱毒 疫苗復制許可的宿主細胞，培養轉染后的宿主細胞；和

(4)收獲上清液，過濾后繼續敏感細胞傳代或接種雞胚尿囊腔拯救重 組病毒株，

其中用于表達血凝素蛋白的新城疫LaSota弱毒疫苗是AV1615，所述 禽流感病毒H9亞型血凝素蛋白的基因序列如SEQ?ID?No.2所示。

5.根據權利要求4的方法，其中所述轉錄質粒是pBRN-FL-H9HA。

6.根據權利要求4的方法，其中所述轉錄輔助質粒是質粒pBSNP、 pBSP和pBSL。