[發明專利]雌激素相關受體2在維持小鼠胚胎干細胞多能性中的應用無效
| 申請號： | 200810219195.3 | 申請日： | 2008-11-18 |
| 公開（公告）號： | CN101492677A | 公開（公告）日： | 2009-07-29 |
| 發明（設計）人： | 裴端卿;張小飛;張娟;王濤 | 申請（專利權）人： | 中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院 |
| 主分類號： | C12N15/12 | 分類號： | C12N15/12;C12N5/10;C12Q1/68;G01N33/53 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 510663廣東省廣州*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 雌激素 相關 受體 維持 小鼠 胚胎 干細胞 多能 中的 應用 | ||
1.Esrrb基因的用途，其在轉染入胚胎干細胞并表達后可以使得胚胎干細胞不依賴于LIF而維持其多能性。
2.權利要求1所述的用途，其中Esrrb基因來源于哺乳動物。
3.權利要求2所述的用途，其中Esrrb基因來源于小鼠。
4.權利要求1所述的用途，其中胚胎干細胞為小鼠胚胎干細胞。
5.權利要求2所述的用途，其中所述小鼠胚胎干細胞為CGR8?ES或者E14T?ES。
6.權利要求1所述的用途，其中轉染是通過脂質體轉染、基因槍、病毒(例如腺病毒)介導的轉染、電穿孔等進行的。
7.使用Esrrb基因維持胚胎干細胞多能性的方法，所述方法包括
(a)構建在ES細胞中表達的包含Esrrb基因的載體；
(b)將(a)中構建的載體轉染進胚胎干細胞中；
(c))在適合于胚胎干細胞生長的條件下培養步驟(b)中得到的胚胎干細胞；
(d)去掉維持胚胎干細胞所需的白細胞介素生長因子；
(e)檢測胚胎干細胞中維持多能性和發生分化的標志性基因。
8.權利要求7所述的方法，其還包括步驟：
(f)對內源維持干細胞多能性的因子進行檢測。
9.權利要求7或8所述的方法，其中包含Esrrb基因的載體是使用pPyCAGIP載體構建的。
10.權利要求7或8所述的方法，其中使用的Esrrb基因是小鼠Esrrb基因。
11.權利要求7或8所述的方法，其中所使用的胚胎干細胞是小鼠胚胎干細胞。
12.權利要求10所述的方法，其中所述小鼠胚胎干細胞為CGR8ES或者E14T?ES。
13.權利要求7所述的方法，其中所使用的檢測方法包括對基因的實時定量PCR檢測。
14.權利要求7所述的方法，其中所檢測的多能性標志性基因包括Nanog或Rex-1等，發生分化的標志性基因包括FGF5或T等。
15.權利要求8所述的方法，其中所述對內源基因的檢測為免疫熒光反應檢測。
16.權利要求8所述的方法，其中所檢測的維持干細胞多能性的因子為Nanog和Oct4等。
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