[發明專利]一種人促紅細胞生長素脂質體

無效

• 申請號: 200810216460.2
• 申請日: 2008-09-27
• 公開（公告）號: CN101683521A
• 公開（公告）日: 2010-03-31
• 發明（設計）人: 張水華;潘韻;柴向東;蔣為民;邱小玲;易艷蓉
• 申請（專利權）人: 深圳市海王英特龍生物技術股份有限公司
• 主分類號: A61K38/19
• 分類號: A61K38/19;A61K9/127;A61K38/20;A61K38/21;A61K38/30;A61K47/24;A61P7/06;A61P13/12
• 代理公司: 北京律誠同業知識產權代理有限公司
• 代理人: 黃韌敏

1、一種EPO脂質體，其含有：

a)有效量的EPO或EPO衍生物；

b)中性磷脂；

c)膽固醇或其衍生物；

d)任一帶正電荷類脂化合物；

e)緩沖液；

其中磷脂與膽固醇或其衍生物、類脂化合物的摩爾比為5～10∶1～5∶1～3，所述脂質體為小單層和大多層脂質體共存的脂質體，脂質體粒徑為50～2000nm。

2、權利要求1所述的EPO脂質體，其中所述脂質體粒徑為100～1000nm。

3、權利要求1所述的EPO脂質體，其中所述磷脂選自卵磷脂、大豆磷脂，磷脂酰肌醇、腦磷脂、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿、蛋磷脂酰膽堿、二棕櫚酰-DL-a磷脂酰膽堿、神經鞘磷脂、鞘髓磷脂、二肉豆蔻卵磷脂、二鯨蠟磷酸酯；緩沖液選自pH值為6.4～7.4范圍內的磷酸緩沖液，Tri-HCl緩沖液，碳酸鈉緩沖液或NaCl溶液。

4、權利要求1所述的EPO脂質體，其中所述磷脂為卵磷脂，組分c)為膽固醇，類脂化合物為硬脂酰胺或磷脂酰乙醇胺，緩沖液為pH值為6.4～7.4的磷酸緩沖液。

5、權利要求1～4任一所述的EPO脂質體，其中所述脂質體進一步包含有免疫調節劑和/或附加劑，免疫調節劑選自干細胞生長因子，干擾素，白細胞介素和胰島素樣生長因子I；附加劑為抗氧化劑。

6、權利要求1所述的EPO脂質體，其中以凍干水化法或逆相蒸發法制備所述脂質體。

7、權利要求1所述EPO脂質體的制備方法，包括下述步驟：

1)將磷脂、膽固醇或其衍生物及類脂化合物以摩爾比5～10∶1～5∶1～3溶于有機溶媒中，置于旋轉蒸發器中，除去有機溶媒形成磷脂膜；

2)加入緩沖液，40～60℃繼續旋轉蒸發，水浴式超聲處理10～20分鐘，形成脂質體懸液；

3)將脂質體懸液與EPO溶液混合，脂質體粉碎均勻，加入冷凍保護劑，進行冷凍干燥；

4)滅菌，得到凍干粉劑；加無菌水、震蕩、再水化融合；得到脂質體EPO。

8、權利要求7所述的制備方法，其中所述的緩沖液選自pH為6.4～7.4的磷酸緩沖液，Tri-HCl緩沖液，碳酸鈉緩沖液或NaCl溶液，所述有機溶媒選自二氯甲烷、氯仿、甲醇其中一種或兩種以上的混合溶液。

9、權利要求1所述EPO脂質體的制備方法，包括下述步驟：

1)將磷脂、膽固醇或其衍生物及類脂化合物以摩爾比5～10∶1～5∶1～3溶于有機溶媒中，加入緩沖溶液，在水浴35～60℃條件下超聲處理10～20分鐘，得到穩定的油包水乳液；

2)在40～60℃下減壓蒸發，得到膠態物質；

3)加入含EPO的緩沖液，40～60℃旋轉蒸發，減壓蒸發10～20分鐘，除去微量有機溶媒，得到脂質體水性混懸液，放置20～40分鐘，透析，除去游離的未包入脂質體的EPO；

4)滅菌；得到脂質體EPO。

10、權利要求9所述的制備方法，其中所述的緩沖液選自pH為6.4～7.4的磷酸緩沖液，Tri-HCl緩沖液，碳酸鈉緩沖液或NaCl溶液，所述有機溶媒選自二氯甲烷、氯仿、甲醇其中一種或兩種以上的混合溶液。