[發明專利]間接標記納米顆粒的抗體檢測雙抗原夾心法及其試劑盒

有效

• 申請號: 200810216400.0
• 申請日: 2008-09-24
• 公開（公告）號: CN101363848A
• 公開（公告）日: 2009-02-11
• 發明（設計）人: 崔鵬;胡鵬;何志強;曹菲;李泓彥
• 申請（專利權）人: 深圳市菲鵬生物股份有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/569;G01N33/571;G01N33/576
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 劉冬;林毅斌

1.一種納米顆粒類標記物在制備抗體檢測雙抗原夾心法的試劑盒中的用途，其中包括步驟(i)將包被抗原包被在固相支持物上面，(ii)標記抗原標記納米顆粒類標記物，(iii)加入待檢樣品，使其中的待檢抗體與上述兩種抗原在固相支持物上結合形成可檢測的復合物；其特征在于，納米顆粒類標記物與標記抗原之間的標記是通過抗原上的標簽和標記在納米顆粒類標記物上的可特異性識別該標簽的配體相結合來完成的間接標記，并且所述配體除與標簽結合外不與標記抗原或包被抗原結合，從而使納米顆粒類標記物與標記抗原以比例可控的方式進行標記；其中所述標記抗原為基因工程重組抗原；

所述納米顆粒類標記物是膠體金、膠體銀或者膠體硒；

所述標簽為選擇以下的多肽或蛋白：His?Tag、T7?Tag、S?Tag、Flag?Tag、HA?Tag、GST融合蛋白、Trx融合蛋白、SOD融合蛋白、CKS融合蛋白、DsbA融合蛋白、MBP融合蛋白、CBD融合蛋白，或者為生物素；以及

所述的配體為針對標簽的特異性抗體或者鏈霉親和素。

2．?根據權利要求1的用途，其中待檢抗體包括但不限于艾滋病毒抗體、甲型肝炎病毒抗體、乙型肝炎病毒抗體、丙型肝炎病毒抗體、丁型肝炎病毒抗體、戊型肝炎病毒抗體、庚型肝炎病毒抗體、風疹病毒抗體、人巨細胞病毒抗體、單純皰疹病毒1型抗體、單純皰疹病毒2型抗體、狂犬病毒抗體、人類T淋巴細胞白血病病毒抗體、登革熱病毒抗體、人乳頭瘤病毒抗體、西尼羅河病毒抗體、森林腦炎病毒抗體、麻疹病毒抗體、流感病毒抗體、副流感病毒抗體、水痘病毒抗體、艾柯病毒抗體、柯薩奇病毒抗體、乙型腦炎病毒抗體、EB病毒抗體、腮腺炎病毒抗體、梅毒螺旋體抗體、包柔氏螺旋體抗體、沙眼衣原體抗體、肺炎衣原體抗體、鸚鵡熱衣原體抗體、解脲脲原體抗體、肺炎支原體抗體、結核分枝桿菌抗體、幽門螺旋桿菌抗體、淋球菌抗體、瘧原蟲抗體、枯氏錐蟲抗體、弓形蟲抗體。

3．?根據權利要求1的用途，其采用快速檢測法。

4．?根據權利要求3的用途，其中所述快速檢測法包括層析法和滲濾法。

5．?根據權利要求1的用途，其中所述的標簽為生物素。

6．?根據權利要求1的用途，其中所述的配體為鏈霉親和素。

7．?根據權利要求5的用途，其中所述標簽為生物素的標記方法指體內酶促生物素化。

8．?一種權利要求1-7任一項的用途所制備的抗體檢測雙抗原夾心法的免疫檢測試劑盒，所述試劑盒包含：包被在固相支持物上的包被抗原；標記抗原以及與之綴合的標簽；納米顆粒類標記物以及標記在其上的可特異性識別該標簽的配體；其特征在于，所述配體與標簽特異性結合，并且所述配體除與標簽結合外不與標記抗原或包被抗原結合，從而使納米顆粒類標記物與標記抗原以比例可控的方式進行標記；其中所述標記抗原為基因工程重組抗原。