[發明專利]源于鏈霉菌屬的環氧化物水解酶

無效

• 申請號: 200810213640.5
• 申請日: 2000-07-26
• 公開（公告）號: CN101363015A
• 公開（公告）日: 2009-02-11
• 發明（設計）人: F·措赫爾;M·恩策爾貝格;R·D·施米德;W·沃萊本;B·豪爾
• 申請（專利權）人: BASF公司
• 主分類號: C12N9/14
• 分類號: C12N9/14;C12N1/20;C12P41/00;C12P7/02;C12Q1/34;C12Q1/04;C12R1/48
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 李連濤

1.環氧化物水解酶(E.C.3.3.2.3)，它是從鏈霉菌屬微生物中分離得到的，其中所述鏈霉菌屬微生物是灰色鏈霉菌菌株DSM?40236、灰色鏈霉菌菌株DSM?13447、熱普通鏈霉菌菌株DSM?40444、熱普通鏈霉菌菌株DSM?13448、抗生鏈霉菌Tü4菌株DSM?12925、沙場鏈霉菌Tü495菌株DSM?40737、沙場鏈霉菌Tü495菌株DSM?12134或弗氏鏈霉菌Tü27菌株DSM?12131。

2.抗生鏈霉菌Tü4，它被保藏在DSMZ，保藏號為DSM?12925。

3.一種分離環氧化物對映體混合物的方法，該方法包括

a)將含有環氧化物水解酶底物的環氧化物對映體混合物與如權利要求1所述的環氧化物水解酶、鏈霉菌屬的微生物、鏈霉菌屬微生物的含環氧化物水解酶的勻漿或該勻漿的級分一起進行溫育；

b)轉化該對映體混合物；和

c)分離該反應混合物。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于(b)中對映體混合物的轉化直到達到平衡。

5.如權利要求3所述的方法，其特征是將環氧化物的對映體混合物轉化，該混合物選自苯乙烯氧化物、3-苯基縮水甘油酸酯、己烷-1，2-氧化物、癸烷-1，2-氧化物和茚氧化物。

6.一種檢測環氧化物水解酶的方法，其包括

a)在反應條件下，溫育估計有環氧化物水解酶活性的被分析物與該環氧化物水解酶的含環氧化物的底物，其中的被分析物是鏈霉菌屬的細菌、鏈霉菌屬細菌的勻漿或該勻漿的級分；

b)在4-硝基芐基吡啶存在的條件下，與未反應的環氧化物發生顏色反應；和

c)相對不含環氧化物水解酶的對照液，分析由b)步驟得到的溶液的色素濃度的降低值。

7.如權利要求6所述的方法，其特征是定量測定所述色素濃度的相對降低值，從而測定被分析物中的環氧化物水解酶活性。

8.如權利要求6或7所述的方法，其特征是含環氧化物的底物是對映體純形式或對映體混合物形式的苯乙烯氧化物、3-苯基縮水甘油酸酯、己烷-1，2-氧化物和/或茚氧化物。

9.用于檢測具有環氧化物水解酶活性和/或能夠對映選擇性水解環氧化物的微生物的篩選方法，包括如權利要求6-8中的任一項所述的檢測方法。

10.權利要求1所述的環氧化物水解酶、鏈霉菌屬的微生物、含有環氧化物水解酶的該微生物的勻漿或該勻漿的級分用于對映選擇性水解環氧化物的用途。

11.權利要求1所述的環氧化物水解酶、鏈霉菌屬的微生物、含有環氧化物水解酶的該微生物的勻漿或該勻漿的級分用于由相應的環氧化物對映選擇性制備二醇的用途。

12.制備權利要求1的環氧化物水解酶(E.C.3.3.2.3)的方法，其特征是

a)由鏈霉菌屬的微生物培養物制備細胞勻漿；

b)將勻漿分級，任選利用權利要求6至8中的任一項所述的檢測方法檢測得到的級分的環氧化物水解酶活性；和

c)合并具有環氧化物水解酶活性的級分并且任選進一步進行分級。

13.權利要求1的鏈霉菌屬的微生物在環氧化物水解酶(E.C.3.3.2.3)制備中的用途。

14.如權利要求13的用途，其中的環氧化物水解酶具有至少一種下列特性：

a)苯乙烯氧化物以及至少一種選自3-苯基-乙基縮水甘油酸酯、正己烷-1，2-氧化物、正癸烷-1，2-氧化物和茚氧化物的其它化合物的水解環氧裂解；

b)具有對映選擇性E≥2的苯乙烯氧化物的外消旋物轉化生成(S)-苯基-1，2-乙二醇。