[發明專利]環介導恒溫擴增檢測米氏凱倫藻的方法無效
| 申請號: | 200810202511.6 | 申請日: | 2008-11-10 |
| 公開(公告)號: | CN101736079A | 公開(公告)日: | 2010-06-16 |
| 發明(設計)人: | 馬凌波;張鳳英;徐兆禮 | 申請(專利權)人: | 中國水產科學研究院東海水產研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司: | 上海東方易知識產權事務所 31121 | 代理人: | 歐陽俊立 |
| 地址: | 200090 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 環介導 恒溫 擴增 檢測 米氏凱倫藻 方法 | ||
1.環介導恒溫擴增檢測米氏凱倫藻的方法,其特征是針對米氏凱倫藻核糖體間隔區的6個區域設計4條特異性引物,根據LAMP產物產生白色焦磷酸鎂沉淀或LAMP產物與SYBR?Green?I反應呈現綠色判斷為米氏凱倫藻,所述的4條特異性引物序列如下:
引物Primer?????序列Sequence(5’-3’)
F3?????????????CTGTCATCTTGTCATGTGC;
B3?????????????CTAACTTCATGTCATGGAAGG;
FIP(F1c+F2)????TTCAATGCATCAGGGGCAGG-GCAACTGACAGCAGTGTG;
BIP(B1c+B2)????ACACCTTGTGCTTTGTGTGT-TGAAGTGGCAGACAGGAG;
內引物FIP和BIP的濃度均為1.6μM,外引物F3和B3的濃度均為0.2μM,6mM?MgSO4,0.6mM?dNTP,0.6M?Betaine,反應溫度為63℃,反應時間60min。
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