[發明專利]一種同時測定人血漿中霉酚酸酯、霉酚酸及其代謝物的方法

無效

• 申請號: 200810202400.5
• 申請日: 2008-11-06
• 公開（公告）號: CN101419224A
• 公開（公告）日: 2009-04-29
• 發明（設計）人: 道毅俊;焦正;施孝金;李中東;鐘明康
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬華山醫院
• 主分類號: G01N33/48
• 分類號: G01N33/48;G01N30/02;G01N21/64
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司
• 代理人: 包兆宜

1.一種同時測定人血漿中霉酚酸酯、霉酚酸及其代謝物的方法，其特征是 待測樣品預處理后，在分析色譜柱分離后衍生化，然后用熒光檢測器檢測，所述 代謝物為霉酚酸葡糖苷酸化物MPAG；該方法包括以下步驟：

1)樣品預處理

取待測樣品，加入甲醇、乙腈或兩者混合液，進行蛋白沉淀；離心后取上 清液進樣；

2)樣品分離

采用通用型的液相色譜柱，其填料為十八烷基或辛烷基鍵合相硅膠，高效液 相系統采用通用型的紫外和熒光檢測器以及高壓泵，流動相采用等度洗脫；分別 采用紫外和熒光檢測器分別檢測代謝產物葡糖苷酸化物，霉酚酸酯和霉酚酸的峰 面積，用標準曲線方程換算成三者的濃度；

色譜條件是，HPLC系統：LC-10A高效液相儀；色譜柱：ZORBAX?RX-C8 250mm×4.6mm，5μm；流動相：采用等度洗脫，甲醇-0.1％TFA，兩者體積 比為60∶40-50∶50；流速：1.0-1.2ml/min；柱溫40-45℃；熒光激發波長342-344 nm，發射波長425-427nm；

3)樣品柱后衍生化

采用附加一個高壓泵和一個三通連接柱后衍生化試劑，并用串聯方式連接紫 外檢測器和熒光檢測器，使分離后的樣品有熒光信號。

2.根據權利要求1所述的同時測定人血漿中霉酚酸酯、霉酚酸及其代謝物的 方法，其特征是所述的步驟1)的待測樣品為人血漿。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征是所述的色譜條件中，HPLC系統包 括雙泵，紫外檢測器和熒光檢測器。