[發明專利]一種莢膜多糖純化方法有效
| 申請號: | 200810201522.2 | 申請日: | 2008-10-22 |
| 公開(公告)號: | CN101724085A | 公開(公告)日: | 2010-06-09 |
| 發明(設計)人: | 朱為;江元翔;榮家康 | 申請(專利權)人: | 上海生物制品研究所 |
| 主分類號: | C08B37/00 | 分類號: | C08B37/00;A61K39/095;A61K31/715;A61P31/04 |
| 代理公司: | 上海專利商標事務所有限公司 31100 | 代理人: | 徐迅 |
| 地址: | 200052*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 莢膜 多糖 純化 方法 | ||
1.一種細菌莢膜多糖的處理方法,所述方法包括:
(a)在含細菌莢膜多糖的沉淀物中加入終濃度為20-30體積%的低級醇,從而溶解所述莢膜多糖,形成混合液;
(b)對步驟(a)的所述混合液進行固液分離,然后收集上清液;
(c)在步驟(b)所得上清液中加入終濃度為60-90體積%的低級醇,從而形成含細胞莢膜多糖的粗沉淀物,然后收集所述粗沉淀物;
(d)在粗沉淀物中加入終濃度為30-70體積%的低級醇,從而使所述粗沉淀物中的多糖處于溶解狀態,然后對形成的混合液進行固液分離,收集上清液;
(e)在步驟(d)所得上清液中加入終濃度為60-90體積%的低級醇溶液,從而形成莢膜多糖沉淀物;
(f)收集步驟(e)中所得的莢膜多糖沉淀物,即為純化的細菌莢膜多糖,
其中,步驟(c)和步驟(e)中的低級醇終濃度高于步驟(d)中的低級醇終濃度。
2.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述細胞莢膜多糖沉淀物是通過對生物樣品進行處理而獲得的沉淀物。
3.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述細菌選自下組:腦膜炎奈瑟菌、無乳鏈球菌、嗜血流感桿菌、肺炎鏈球菌、或傷寒沙門菌。
4.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述低級醇選自:乙醇、甲醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、2-甲基-1-丙醇、2-甲基-2-丙醇或丙二醇。
5.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述低級醇含有鈣鹽、鈉鹽、鉀鹽或鎂鹽,所述鹽濃度為0.01-2.5M,鹽與低級醇的體積比為10∶4-10∶22。
6.如權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(c)中低級醇的終濃度比步驟(a)中低級醇的終濃度高30-70%,步驟(e)中低級醇的終濃度比步驟(d)中低級醇的終濃度高5-60%。
7.如權利要求1所述的方法,其特征在于,在步驟(b)和(c)之間或步驟(d)和步驟(e)之間還包括對上清液進行過濾和/或濃縮。
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