[發明專利]一種速溶凍干纖維蛋白原和凝血酶制劑組合物、制備方法及其用途

有效

• 申請號: 200810167199.1
• 申請日: 2008-10-08
• 公開（公告）號: CN101371921A
• 公開（公告）日: 2009-02-25
• 發明（設計）人: 余美倫
• 申請（專利權）人: 余美倫
• 主分類號: A61K38/48
• 分類號: A61K38/48;A61P7/04;A61K38/36
• 代理公司: 北京安博達知識產權代理有限公司
• 代理人: 徐國文

1.一種速溶凍干纖維蛋白封閉劑組合物，其特征在于：所述組合物包括：

組合物1和組合物2；

組合物1包括纖維蛋白原凍干粉和纖維蛋白原溶解液，

組合物2包括凝血酶凍干粉和凝血酶溶解液；按mg/ml計：

組合物1的濃度為：纖維蛋白原35～70、檸檬酸鈉9～15、氯化鈉7～12、聚山梨酯 -80?0.3～0.6、甘露醇10～15、精氨酸4～8和谷氨酸3.5～5.5；

組合物2的濃度為：凝血酶700～1200單位/ml，右旋糖酐20?3～6，甘氨酸15～25、 氯化鈉5～7和氯化鈣4～7。

2.一種如權利要求1所述的速溶的凍干纖維蛋白封閉劑組合物，其特征在于：

組合物1的濃度為：纖維蛋白原45～70、檸檬酸鈉10～12.5、氯化鈉8～10、聚山梨 酯-80?0.4～0.6、甘露醇10～12、精氨酸5～7和谷氨酸4～5；

組合物2的濃度為：凝血酶800～1150單位/ml、右旋糖酐20?3～6、甘氨酸15～25、 氯化鈉6～7和氯化鈣5～6。

3.一種如權利要求1或2所述的速溶的凍干纖維蛋白封閉劑組合物，其特征在于：

組合物1的濃度為：纖維蛋白原50，檸檬酸鈉12，氯化鈉9，聚山梨酯-80?0.5，甘 露醇12、精氨酸6和谷氨酸4.8；

組合物2的濃度為：凝血酶1000單位/ml，右旋糖酐20?4.5，甘氨酸25、氯化鈉6和 氯化鈣5.5。

4.一種如權利要求3所述的速溶凍干纖維蛋白封閉劑組合物，其特征在于：組合物1的pH 值為7.4～7.8。

5.一種如權利要求3所述的速溶凍干纖維蛋白封閉劑組合物，其特征在于：組合物2的pH 值為5.8～6.3。

6.上述任一權利要求所說的速溶凍干纖維蛋白封閉劑組合物的制備方法，其特征在于： 所說組合物1和組合物2的制備方法如下：

(1)組合物1中纖維蛋白原凍干粉的制備方法：

①每ml豬全血中加入抗凝劑檸檬酸鈉3.8mg，以3500轉/分、0～4℃低溫離心30分鐘， 0.2μm微孔濾膜過濾得濾液；

②所得濾液降溫至-2℃，加入預冷至-20℃的低溫乙醇分步分離得纖維蛋白原沉淀物；

③按每g所得纖維蛋白原沉淀加入每毫升含檸檬酸鈉12mg和氯化鈉9mg的溶解液2ml， 使其完全溶解，加入聚山梨酯-80?10mg和磷酸三丁酯3mg，用1％NaOH調至pH7.0；

④24～28℃下攪拌8小時滅活脂包膜病毒；

⑤降溫至-2℃，加入預冷至-20℃的低溫乙醇分離沉淀，將纖維蛋白原按每g沉淀用每毫 升含氯化鈉9mg和檸檬酸鈉6mg的溶解液2ml溶解，加入聚山梨酯-80?0.2mg和甘露 醇12mg；

⑥0.2μm微孔濾膜除菌過濾、-70℃冷凍、1-10pa真空干燥；

⑦對所得凍干后的纖維蛋白原于95～105℃干熱滅活30分鐘；

(2)組合物1的纖維蛋白原溶解液的制備

①取精氨酸5mg用無熱原蒸餾水1ml溶解；

②再加入谷氨酸4mg攪拌溶解，溶液應為pH7.4～7.8；

③0.2μm微孔濾膜除菌過濾；

④對所制得的纖維蛋白原溶解液于95～105℃干熱滅活30分鐘；

(3)組合物2的凝血酶凍干粉的制備

①按1ml豬全血中加入草酸鈉13.4mg的比例加入草酸鈉，3500r/min離心30min分離出抗 凝豬血漿；

②按每ml所得血漿加入硫酸鋇0.1g的比例加入硫酸鋇吸附凝血酶原，使用純化水洗滌沉 淀；

③每1g沉淀用1ml的0.3mg/ml檸檬酸鈉溶液洗脫，每毫升洗脫液加入組織凝血活酶5mg 和氯化鈣3mg，將凝血酶原激活成為凝血酶，離心去沉淀；截留分子量10萬超濾去除 大分子蛋白

④在每ml溶液中加入聚山梨酯-8010mg和磷酸三丁酯3mg；

⑤于24～28℃攪拌8小時S/D滅活病毒，截留分子量2萬超濾洗滌純化，濃縮得凝血酶 溶液；

⑥在上述每ml凝血酶溶液中加入右旋糖酐204.5mg和甘氨酸25mg，0.2μm微孔除菌過 濾，-70℃冷凍1-10pa真空干燥；

⑦將凍干后的凝血酶于95～105℃干熱滅活30分鐘；

(4)組合物2的凝血酶溶解液的制備：

①取氯化鈉6mg，氯化鈣55mg，用無熱原蒸餾水1ml溶解，除菌過濾，分裝；

②將分裝后凝血酶溶解液于95～105℃干熱滅活30分。