[發(fā)明專利]產(chǎn)毒素B艱難梭菌環(huán)介導(dǎo)等溫擴增快速檢測方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200810157902.0 | 申請日： | 2008-10-15 |
| 公開（公告）號： | CN101402998A | 公開（公告）日： | 2009-04-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 雷質(zhì)文;賀楠;馬維興;祝素珍;張健;姜英輝;李正義;房保海;唐靜;賈俊濤;劉云國;趙麗青 | 申請（專利權(quán)）人： | 山東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 青島海昊知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所有限公司 | 代理人： | 張中南 |
| 地址： | 266002*** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 毒素 艱難 梭菌環(huán)介導(dǎo) 等溫 擴增 快速 檢測 方法 | ||
1.一種產(chǎn)毒素B艱難梭菌恒溫擴增快速檢測試劑盒，其特征在于其中的 試劑包括(1)-(4)：
(1)環(huán)介導(dǎo)等溫擴增反應(yīng)液：
包括10×Thermopol反應(yīng)緩沖液、1.0-1.4mmol/L?dNTP、4-8mmol/L 硫酸鎂(MgSO4)、0.8-1.6μmol/L上游內(nèi)引物(FIP)、0.8-1.6μmol/L 下游內(nèi)引物(BIP)、0.2-0.3μmol/L上游外引物(F3)、0.2-0.3μmol/L 下游外引物(B3)和1-1.5mol/L甜菜堿；其中10×Thermopol反應(yīng)緩沖 液含有200mmol/L?pH8.8的三羥基甲基氨基甲烷-鹽酸、100mmol/L氯 化鉀、100mmol/L硫酸銨、20mmol/L硫酸鎂和1％曲拉通X-100；
其中上游內(nèi)引物：
5-AGGAGAAGCAATTGATTTTACTGGA-TACAGCTCCTCTATAATTATCTTCA-3、 ???下游內(nèi)引物：
5-AAGTGTATTAGCTGGGGCAAAATAT-TATTTCAACCAAAGTGGAGTGT-3、
上游外引物：5-TTCACCATCTAATTCTTTCCATTC-3、
下游外引物：5-CAATTGGAGAGACAATAATTGATG-3、
(2)UNG酶：1U/μL；
(3)Bst?DNA聚合酶：8U/μL；
(4)顯色劑：為10％的熒光染料SYBR?GREEN?I或者DNAGreen。
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