[發明專利]一種美洲大蠊藥材及其提取物的指紋圖譜質量測定方法

有效

• 申請號: 200810116773.0
• 申請日: 2008-07-17
• 公開（公告）號: CN101320027A
• 公開（公告）日: 2008-12-10
• 發明（設計）人: 王利春;孔繁貴;瘳軍;魏胄;梁隆;程志鵬
• 申請（專利權）人: 四川科倫藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 北京太兆天元知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 張韜

技術領域

本發明涉及一種中藥材的質量測定方法，特別是涉及美洲大蠊藥材及其提取物的指紋圖譜質量測定方法。

背景技術

美洲大蠊藥材收載于《云南省藥品標準》1996年版，主要成分為氨基酸(丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸等)和生物堿(尿嘧啶等)。在該藥材質量標準僅進行了總氨基酸的含量測定和氨基酸的鑒別，以上方法均不能較好的控制美洲大蠊藥材，特別是主要有效成分生物堿的質量控制。而對美洲大蠊藥材及提取物中生物堿的HPLC指紋圖譜方法測定至今尚無報道。因此，通過研究，建立重復性高的美洲大蠊藥材及提取物中生物堿的HPLC指紋圖譜的測定方法，可作為測定美洲大蠊藥材及提取物中生物堿的化學組分方法，也可作為鑒定美洲大蠊藥材及提取物質量控制方法。

發明內容

本發明的目的在于公開美洲大蠊藥材及其提取物的指紋圖譜的質量測定方法。

本發明目的是通過如下技術方案實現的。

本發明美洲大蠊藥材的指紋圖譜質量測定方法，該方法包括如下步驟：

A、供試品溶液的制備：稱取美洲大蠊1～10重量份，加50～95％乙醇20～200體積份，回流1～8小時，放冷，濾過，濾液回收乙醇，置25體積份量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過得續濾液；取陽離子交換樹脂，研磨，過40～60目篩去粗粒，再過140～160目篩去細粒，用水浸泡18～30小時，傾去水后用2～3倍量的2mol/L鹽酸溶液浸泡1～3小時，間隔攪拌3～5次，除去酸液，用水洗至近中性，加3～5倍量的1mol/L氫氧化鈉溶液浸泡1～3小時，間隔攪拌3～5次，除去堿液，用水洗至近中性，加2～4倍量的2mol/L鹽酸溶液，浸泡1～3小時，間隔攪拌3～5次，除去酸液，用水洗至近中性，水中浸泡放置，備用；取續濾液10體積份，加于已處理好的陽離子交換樹脂柱上，收集流出液，用5-10體積份水洗滌陽離子交換樹脂柱，收集洗滌液，與流出液合并，轉移至25體積份量瓶中，定容，搖勻，備用；

B.對照品溶液的制備：稱取尿嘧啶，加水制成每體積份含尿嘧啶0.0000002～0.0001重量份的溶液，作為對照品溶液；

C.測定：色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.01～0.2mol/L的磷酸氫二銨溶液為流動相；檢測波長為240～280nm；吸取供試品溶液和對照品溶液各0.005～0.05體積份注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，得到美洲大蠊藥材的指紋圖譜；供試品指紋圖譜應與標準指紋圖譜相似度應大于0.90；美洲大蠊藥材共有11個共有指紋峰，參照峰S為尿嘧啶色譜峰，11個共有指紋峰的相對保留時間分別為：1號峰0.480±0.048，2號峰0.508±0.051，3號峰0.556±0.056，4號峰0.629±0.063，5號峰0.780±0.078，S號峰1.000±0.000，6號峰1.295±0.130，7號峰1.901±0.190，8號峰2.108±0.211，9號峰2.655±0.266，10號峰3.515±0.352；11個共有指紋峰中，5個峰面積的比值分別為：2號峰∶3號峰∶4號峰∶S號峰∶8號峰＝(0.223～0.414)∶(0.188～0.349)∶(0.996～1.494)∶1.000∶(0.376～0.626)。

本發明美洲大蠊藥材的指紋圖譜質量測定方法，優選如下檢測方法：

A、供試品溶液的制備：稱取美洲大蠊5重量份，加85％乙醇50體積份，回流3小時，放冷，濾過，濾液回收乙醇，置25體積份量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過得續濾液；取陽離子交換樹脂，研磨，過50目篩去粗粒，再過150目篩去細粒，用水浸泡24小時，傾去水后用2～3倍量的2mol/L鹽酸溶液浸泡2小時，間隔攪拌4次，除去酸液，用水洗至近中性，加4倍量的1mol/L氫氧化鈉溶液浸泡2小時，間隔攪拌4次，除去堿液，用水洗至近中性，加3倍量的2mol/L鹽酸溶液，浸泡2小時，間隔攪拌4次，除去酸液，用水洗至近中性，水中浸泡放置，備用；取續濾液10體積份，加于已處理好的陽離子交換樹脂柱上，收集流出液，用10體積份水洗滌陽離子交換樹脂柱，收集洗滌液，與流出液合并，轉移至25體積份量瓶中，定容，搖勻，備用；

B、對照品溶液的制備：稱取尿嘧啶，加水制成每體積份含尿嘧啶0.00001重量份的溶液，作為對照品溶液；