[發(fā)明專利]一種美洲大蠊藥材及其提取物的指紋圖譜質(zhì)量測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810116773.0
• 申請(qǐng)日: 2008-07-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101320027A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-12-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王利春;孔繁貴;瘳軍;魏胄;梁隆;程志鵬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川科倫藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 北京太兆天元知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 張韜

1.一種美洲大蠊藥材的指紋圖譜質(zhì)量測(cè)定方法，其特征在于該方法包括如下步驟：

A、供試品溶液的制備：稱取美洲大蠊1～10重量份，加50～95％乙醇20～200體積份，回流1～8小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液回收乙醇，置25體積份量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)得續(xù)濾液；取陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，研磨，過(guò)40～60目篩去粗粒，再過(guò)140～160目篩去細(xì)粒，用水浸泡24小時(shí)，傾去水后用2～3倍量的2mol/L鹽酸溶液浸泡1～3小時(shí)，間隔攪拌3～5次，除去酸液，用水洗至近中性，加3～5倍量的1mol/L氫氧化鈉溶液浸泡1～3小時(shí)，間隔攪拌3～5次，除去堿液，用水洗至近中性，加2～4倍量的2mol/L鹽酸溶液，浸泡1～3小時(shí)，間隔攪拌3～5次，除去酸液，用水洗至近中性，水中浸泡放置，備用；取續(xù)濾液10體積份，加于已處理好的陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱上，收集流出液，用5-10體積份水洗滌陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱，收集洗滌液，與流出液合并，轉(zhuǎn)移至25體積份量瓶中，定容，搖勻，備用；

B.對(duì)照品溶液的制備：稱取尿嘧啶，加水制成每體積份含尿嘧啶0.0000002～0.0001重量份的溶液，作為對(duì)照品溶液；

C.測(cè)定：色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.01～0.2mol/L的磷酸氫二銨溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為240～280nm；吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各0.005～0.05體積份注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測(cè)定，得到美洲大蠊藥材的指紋圖譜；供試品指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜相似度應(yīng)大于0.90；美洲大蠊藥材共有11個(gè)共有指紋峰，參照峰S為尿嘧啶色譜峰，11個(gè)共有指紋峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為：1號(hào)峰0.480±0.048，2號(hào)峰0.508±0.051，3號(hào)峰0.556±0.056，4號(hào)峰0.629±0.063，5號(hào)峰0.780±0.078，S號(hào)峰1.000±0.000，6號(hào)峰1.295±0.130，7號(hào)峰1.901±0.190，8號(hào)峰2.108±0.211，9號(hào)峰2.655±0.266，10號(hào)峰3.515±0.352，11個(gè)共有指紋峰中，5個(gè)峰面積的比值分別為：2號(hào)峰∶3號(hào)峰∶4號(hào)峰∶S號(hào)峰∶8號(hào)峰＝(0.223～0.414)∶(0.188～0.349)∶(0.996～1.494)∶1.000∶(0.376～0.626)。

2.如權(quán)利要求1所述的指紋圖譜質(zhì)量測(cè)定方法，其特征在于該方法包括如下步驟：

A、供試品溶液的制備：稱取美洲大蠊5重量份，加85％乙醇50體積份，回流3小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液回收乙醇，置25體積份量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)得續(xù)濾液；取陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，研磨，過(guò)50目篩去粗粒，再過(guò)150目篩去細(xì)粒，用水浸泡24小時(shí)，傾去水后用2～3倍量的2mol/L鹽酸溶液浸泡2小時(shí)，間隔攪拌4次，除去酸液，用水洗至近中性，加4倍量的1mol/L氫氧化鈉溶液浸泡2小時(shí)，間隔攪拌4次，除去堿液，用水洗至近中性，加3倍量的2mol/L鹽酸溶液，浸泡2小時(shí)，間隔攪拌4次，除去酸液，用水洗至近中性，水中浸泡放置，備用；取續(xù)濾液10體積份，加于已處理好的內(nèi)徑為1.5cm，床高為2cm的陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱上，收集流出液，用10體積份水洗滌陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱，收集洗滌液，與流出液合并，轉(zhuǎn)移至25體積份量瓶中，定容，搖勻，備用；

B、對(duì)照品溶液的制備：稱取尿嘧啶，加水制成每體積份含尿嘧啶0.00001重量份的溶液，作為對(duì)照品溶液；

C、測(cè)定：色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.05mol/L的磷酸氫二銨溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為259nm；吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各0.02體積份注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測(cè)定，得到美洲大蠊藥材的指紋圖譜；供試品指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜相似度應(yīng)大于0.90；美洲大蠊藥材共有11個(gè)共有指紋峰，參照峰S為尿嘧啶色譜峰，11個(gè)共有指紋峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為：1號(hào)峰0.480±0.048，2號(hào)峰0.508±0.051，3號(hào)峰0.556±0.056，4號(hào)峰0.629±0.063，5號(hào)峰0.780±0.078，S號(hào)峰1.000±0.000，6號(hào)峰1.295±0.130，7號(hào)峰1.901±0.190，8號(hào)峰2.108±0.211，9號(hào)峰2.655±0.266，10號(hào)峰3.515±0.352，11個(gè)共有指紋峰中，5個(gè)峰面積的比值分別為：2號(hào)峰∶3號(hào)峰∶4號(hào)峰∶S號(hào)峰∶8號(hào)峰＝(0.223～0.414)∶(0.188～0.349)∶(0.996～1.494)∶1.000∶(0.376～0.626)。