[發(fā)明專(zhuān)利]一種蘇云金芽孢桿菌伴孢晶體反浮選分離純化生產(chǎn)工藝

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810104712.2
• 申請(qǐng)日: 2008-04-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101260144A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-09-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 弓愛(ài)君;李紅梅;王子佳;曹艷秋;邱麗娜;蔣辰
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京科技大學(xué);中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院
• 主分類(lèi)號(hào): C07K1/14
• 分類(lèi)號(hào): C07K1/14;C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1、一種蘇云金芽孢桿菌伴孢晶體反浮選分離純化生產(chǎn)工藝，其特征在于：按重量百分比稱(chēng)取牛肉膏0.2～0.4％，蛋白胨0.6～1.5％，氯化鈉0.3～0.6％，瓊脂1.3～2.5％，水95～98％，用NaOH調(diào)pH＝7.4～7.6，100～130℃滅菌20～40分鐘，在潔凈工作臺(tái)中將滅菌后的液體倒入已滅過(guò)菌的大培養(yǎng)皿中，自然冷卻至室溫，液體凝固形成瓊脂固體培養(yǎng)基；用接種環(huán)沾取Bt菌種，在瓊脂固體培養(yǎng)基表面接種，之后在生化培養(yǎng)箱中26～36℃培養(yǎng)36～48小時(shí)；用無(wú)菌純凈水將菌苔沖洗到容器中，得到無(wú)菌水菌苔懸濁液；用超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)處理菌苔懸濁液10～30分鐘后，將此菌苔懸濁液注入微泡浮選柱中浮選；在此反浮選過(guò)程中，芽孢和營(yíng)養(yǎng)體碎片進(jìn)入泡沫層而脫離體系，伴孢晶體則留在液漿中，之后以7000～9000轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速離心液漿10～20min，棄去上清液，得到伴孢晶體半成品；洗滌伴孢晶體半成品，以7000～9000轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速離心，得到含水的伴孢晶體，在-20～-80℃，0.1～1.0Pa真空度條件下干燥3～4小時(shí)，得到伴孢晶體純品。

2、如權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)工藝，其特征在于，在瓊脂固體培養(yǎng)基表面上按“之”字形接種。

3、如權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述的浮選是將菌苔懸濁液逐步注入30～100L微泡浮選柱中，浮選的進(jìn)氣量為2～8L/min，浮選10～30分鐘。

4、如權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述的洗滌伴孢晶體半成品是用0.5～1.5M?NaCl生理鹽水洗滌伴孢晶體半成品3～5次，每次10～15L，再用無(wú)菌純凈水洗滌伴孢晶體半成品3～5次。

5、如權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)工藝，其特征在于，得到的伴孢晶體純品于-20～-80℃環(huán)境中保存。