[發(fā)明專利]脫γ羧基凝血酶原微孔板化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒及其制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810104145.0
• 申請日: 2008-04-16
• 公開（公告）號: CN101377505A
• 公開（公告）日: 2009-03-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張倩云;應(yīng)希堂;宋勝利;胡國茂;鄭金來;于尚永
• 申請（專利權(quán)）人: 北京科美東雅生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/543;G01N21/76
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• 代理人: 暫無信息

1、一種脫γ羧基凝血酶原(DCP)化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括：

1)DCP校準品；

2)DCP多克隆抗體包被的微孔板；

3)辣根過氧化物酶標記的DCP單克隆抗體；

4)發(fā)光底物液；

5)濃縮洗滌液

2、如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述微孔板所用的包被原DCP多克隆抗體，首先與DCP干擾物混合，具體的，干擾物包括凝血酶、凝血素和血纖維素及其類似物。然后進行離心分離，從而將抗體純化。

3、一種制備權(quán)利要求1所述試劑盒的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1)以DCP純品配制校準品；

2)制備純化的DCP多克隆抗體，包被微孔板；

3)制備辣根過氧化物酶標記的抗抗DCP單克隆抗體；

4)配制辣根過氧化物酶所作用的化學(xué)發(fā)光底物液；

5)配制濃縮洗滌液；

6)分裝上述各組分，并組裝為成品。

4.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述包被固相載體的步驟3)，包括以下步驟：純化后的DCP多克隆抗體配制成包被緩沖液；DCP多克隆抗體包被緩沖液過夜包被微孔板；生理鹽水洗滌后，以封閉液封閉；再干燥后封板，于4℃保存。

5.如權(quán)利要求4所述，其特征在于，所述封閉液為復(fù)合封閉液：1000mL磷酸緩沖液，含0.2g?NaH₂PO₄·2H₂O、2.9g?NaH₂PO₄·12H₂O，加入10g?BSA、1g水解明膠和1mL生物防腐劑，所述封閉液的pH值為7.0～7.6，然后將所得封閉液負載于上述洗滌后的固相載體上。

6、如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述化學(xué)發(fā)光底物液包含A液和B液，其中，

所述化學(xué)發(fā)光底物A液，包括10mM魯米諾、0.3mM?4-羥基聯(lián)苯、0.05mM?4-碘苯硼酸、0.2M?pH8.7硼酸-硼砂緩沖液，其pH值為8.0～10.0；

所述化學(xué)發(fā)光底物B液，包括3.5mM過氧化脲、0.1％?Tween20、0.2M?pH7.2磷酸鹽緩沖液，其pH值為7.0～7.6。

7.如權(quán)利要求1所述試劑盒，其特征在于，所述濃縮洗滌液使用前需用去離子水30倍稀釋。