[發明專利]一種CK19重組腺相關病毒載體及其構建方法與應用

無效

• 申請號: 200810093222.7
• 申請日: 2008-04-23
• 公開（公告）號: CN101307328A
• 公開（公告）日: 2008-11-19
• 發明（設計）人: 劉勇;保羅·L·赫蒙納特
• 申請（專利權）人: 廣州博沃津生物技術有限公司
• 主分類號: C12N15/86
• 分類號: C12N15/86;C12N15/12;C12N7/01;C12N5/10;A61K38/17;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司
• 代理人: 魯兵

1、一種CK19重組腺相關病毒載體，是將腺相關病毒載體中的腺相關病毒結構基 因替換為角蛋白-19基因或其突變型基因得到的重組腺相關病毒載體。

2、根據權利要求1所述的CK19重組腺相關病毒載體，其特征在于：將所述重組 腺相關病毒載體中的p5啟動子替換為巨噬細胞病毒啟動子、beta肌動蛋白啟動子和 SV40病毒啟動子中的一個或幾個啟動子。

3、一種構建權利要求1所述CK19重組腺相關病毒載體的方法，是先將腺相關病 毒載體中的腺相關病毒結構基因剔除，再用角蛋白-19基因或其突變型基因取代該剔 除基因，得到重組腺相關病毒載體。

4、根據權利要求3所述的構建方法，其特征在于：所述方法還包括將所述重組 腺相關病毒載體中的p5啟動子替換為巨噬細胞病毒啟動子、beta肌動蛋白啟動子和 SV40病毒啟動子中的一個或幾個啟動子的步驟。

5、與權利要求1所述CK19重組腺相關病毒載體相關的產品，包括重組腺相關病 毒質粒、重組腺相關病毒顆粒和被重組腺相關病毒載體感染或轉染的細胞系。

6、根據權利要求5所述的產品，其特征在于：所述細胞系包括單核細胞-巨噬細 胞-樹突狀細胞系和T淋巴細胞系。

7、權利要求1或2所述的CK19重組腺相關病毒載體在制備抗腫瘤藥物中的應用。

8、權利要求5或6所述的產品在制備抗腫瘤藥物中的應用。

9、根據權利要求7或8所述的應用，其特征在于：所述腫瘤為宮頸癌、肺鱗癌 或鼻咽癌。

10、一種體外殺滅腫瘤的方法，包括以下步驟：

1)將腫瘤所在體系中自然產生的單核細胞-巨噬細胞-樹突狀細胞或T淋巴細胞被 權利要求1或2所述的攜帶野生型角蛋白-19基因的重組腺相關病毒載體和/或攜帶突 變型角蛋白-19基因的重組腺相關病毒載體感染或轉染，或被權利要求5或6所述的 產品處理，各自得到處理后的細胞；

2)將步驟1)中處理后的單核細胞-巨噬細胞-樹突狀細胞加入腫瘤所在體系中 殺滅腫瘤；或將未被處理的T淋巴細胞與所述處理后的單核細胞-巨噬細胞-樹突狀細 胞混合培養形成抗原特異性細胞毒性T淋巴細胞，再將該抗原特異性細胞毒性T淋巴 細胞加入腫瘤所在體系中殺滅腫瘤；或將被處理的T淋巴細胞和未被處理的單核細胞 -巨噬細胞-樹突狀細胞加入腫瘤所在體系中殺滅腫瘤。