[發明專利]一種培育高含量甜葉菊糖苷遺傳材料的方法

無效

• 申請號: 200810092671.X
• 申請日: 2008-04-21
• 公開（公告）號: CN101258834A
• 公開（公告）日: 2008-09-10
• 發明（設計）人: 王貴民;郝再彬;董振紅
• 申請（專利權）人: 桂林工學院
• 主分類號: A01H1/04
• 分類號: A01H1/04;A01H1/02;A01H4/00;G01N33/48;G01N30/00;C12N5/04
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1、一種培育高含量甜葉菊糖苷遺傳材料的方法，其特征在于具體步驟為：

(1)對單株植株進行初步篩選；

(2)將初選植株的葉片使用直徑0.5～1.5cm打孔器打孔，避開葉片的主脈打取1～10片，重量0.5±0.005克；將葉片破碎后，采用下列測定糖苷的試劑組成進行一般性測定；將200g酒石酸鉀鈉，10～30g氫氧化鈉溶于0.8L蒸餾水中；攪拌加熱下，將3，5-二硝基水楊酸3～9g、結晶酚3～9g、亞硫酸鈉3～9g，先后于溶液中溶解；最后再加入鐵氰化鉀0.1～0.5g使其溶解，冷卻后加蒸餾水定容至1L所得到的溶液；

在上述的一般性測定數據結果中優選出優良單株，優良單株占單株的0.1％～10％，利用高效液相色譜儀對優良單株葉片中的甜葉菊糖苷做進一步分析；

(3)初步獲得幾個甜葉菊糖苷含量較高的優良植株，以這些植株為材料進行組織培養擴繁；

(4)將組培苗移植到大田種植，經高效液相色譜儀檢測進一步分析；

(5)將所得的品系自交，經過遺傳方法分析，獲得純合體植株。

2、根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(3)進行組織培養擴繁的培養基如下：甜葉菊再生體系的外植體為無菌苗的莖尖；愈傷組織形成的培養基：MS+6-BA?0.6mg/L+NAA?0.25mg/L；甜葉菊不定芽分化的培養基：MS+6-BA1mg/L+瓊脂6g/L+蔗糖30g/L；甜葉菊不定芽繼代培養基：MS+6-BA?0.5mg/L+NAA?0.05mg/L，瓊脂6g/L+蔗糖30g/L；甜葉菊不定芽生根培養基1/4MS+IBA0.1mg/L+NAA?0.1mg/L；

上述MS：植物組織培養中常用的完全營養培養基，6-BA：6芐基嘌呤；NAA：萘乙酸；IBA：丁基嘌呤。