[發明專利]高純度脂肽、脂肽膠束及其制備方法

有效

• 申請號: 200810087401.X
• 申請日: 2001-01-18
• 公開（公告）號: CN101240013A
• 公開（公告）日: 2008-08-13
• 發明（設計）人: T·J·凱萊赫;賴正吉;J·P·德庫西;P·D·林奇;M·澤諾尼;A·R·塔利亞尼
• 申請（專利權）人: 卡比斯特制藥公司
• 主分類號: C07K1/18
• 分類號: C07K1/18;C07K1/20;C07K7/64;C12P21/00;C12R1/465
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 唐曉峰

本申請是專利申請號為018052126的專利申請的分案申請。

發明的技術領域

本發明涉及高度純凈形式的脂肽，包括達托霉素，它是一種對革蘭氏陽性細菌-包括耐受常規抗生素的菌株-具有有力殺菌活性的脂肽抗生素。本發明還涉及用于制備高度純凈形式脂肽的方法。本發明進一步涉及脂肽的膠束。本發明還涉及脂肽膠束的藥物組合物和使用這些組合物的方法。本發明還涉及從脂肽的無關聯單體制備脂肽膠束和轉化脂肽膠束為無關聯單體的方法。本發明還涉及利用膠束制備脂肽的方法，該方法容易達到商業生產的規模。

發明的背景

革蘭氏陽性感染——包括由耐藥性細菌導致的那些——發病率的迅速增加已經重新引起人們對開發新型抗生素的興趣。其中一類是脂肽抗生素，包括達托霉素。達托霉素對臨床上有關的革蘭氏陽性細菌具有有力的體外殺菌活性，這些細菌導致嚴重的和危及生命的疾病。這些細菌包括耐藥性病原體，例如萬古霉素耐受性腸球菌(VRE)、甲氧西林耐受性金黃色葡萄球菌(MRSA)、糖肽中間體易感性金黃色葡萄球菌(GISA)、凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)和青霉素耐受性肺炎鏈球菌(PRSP)，對它們很少有可供替代的治療劑。例如參見Tally等，1999，Exp.Opin.Invest.Drugs8：1223-1238，以下稱為“Tally”。達托霉素的抑制作用是迅速的、濃度依賴性體外與體內殺菌作用，和相對長效的濃度依賴性體內抗生素后作用。

Baltz在這本書中描述了達托霉素，即：《抗生素的生物工藝學》(BiotechnologyofAntibiotics)，第二版，編輯：W.R.Strohl(NewYork：MarcelDekker，Inc.)，1997，415-435頁，以下稱為″Baltz.″。達托霉素，也被稱為LY146032，是一種能從玫瑰孢鏈霉菌(Streptomycesroseosporus))發酵衍生得到的環狀脂肽抗生素。

達托霉素是玫瑰孢鏈霉菌(S.Roseosporus)的A-21978C₀因子型抗生素中的一員，它由連接到一個環狀13-氨基酸肽的N-末端色胺酸上的癸酰基側鏈構成(圖1)。達托霉素有很好的作用性，因為它抗多數革蘭氏陽性細菌高度有效，并具有高殺菌性和快速作用性，具有低的耐藥性幾率，能有效地對抗具有抗生素耐藥性的生物。現在將此化合物開發成各種制劑以治療由細菌引起的嚴重感染，細菌包括--但不限于--甲氧西林耐受性金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)(MRSA)和萬古霉素耐受性腸球菌(enterococci)(VRE)。

一個美國專利描述了包括達托霉素(LY146032)的A-21978C抗生素及其衍生物，和制造并分離A-21978C抗生素及其衍生物的方法。

美國專利Re.32,333、Re.32,455和4,800,157記載了在水下需氧發酵條件下通過培養玫瑰孢鏈霉菌(Streptomycesroseosporus))NRL15998而合成達托霉素的方法。美國專利4,885,243描述了一種通過用癸脂肪酸或其脂或鹽供給發酵培養基養料而合成達托霉素的改進方法。

美國專利Re.32,310、Re.32,311、4,537,717、4,482,487和4,524,135描述了A-21978C抗生素的脫酰基方法，和此過程中產生的肽核及抗生素衍生物的再酰化方法。所有這些專利都描述了一種純化的脫酰基的A-21978C抗生素核或其衍生物，它們是通過過濾發酵肉湯而分離，然后用DiaionHP-20色譜法和硅膠/C18色譜法純化的。

美國專利Re.32,333和Re.32,455公開了一種純化方法，用此方法所有發酵肉湯的濾出液通過一系列沉淀和萃取步驟而得到粗的A-21978C化合物。這種粗的化合物進一步在IRA-68上進行離子交換色譜法和兩次硅膠色譜法純化。單獨的A-21978C₀因子由反相硅膠或硅膠/C18分離。美國專利Re.32,333和Re.32,455還公開可以通過使用DiaionHP-20樹脂的制備色譜法并隨后進行硅膠柱色譜法的方法純化A-21978C。