[發明專利]一種從鹿茸提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的方法

無效

• 申請號: 200810084902.2
• 申請日: 2008-03-07
• 公開（公告）號: CN101525371A
• 公開（公告）日: 2009-09-09
• 發明（設計）人: 張新宇;劉越;劉洋;袁婧婷
• 申請（專利權）人: 北京前沿科學研究所
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;C07K1/34;C07K1/18;C07K1/16
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種從鹿茸提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的方法，屬于從鹿茸提取活性物質的技術領域。

背景技術

鹿茸為梅花鹿或馬鹿的尚未骨化的幼角，現代藥物化學分析表明，其中存在多種生長因子，其中胰島素樣生長因子(IGF-1)有突出的藥理作用。

胰島素樣生長因子(IGF-1)是一類促進細胞生長、具有胰島素樣代謝效應的因子，對機體生長和發育起著重要的調節作用，臨床上可以用于治療糖尿病、骨質疏松、周圍神經病變、肌肉萎縮性側索性神經炎等。

傳統的鹿茸加工過程中，鹿茸要經過多次煮炸、烘干等步驟，高溫使得其中的胰島素樣生長因子(IGF-1)等活性多肽失去活性從而喪失藥效。為了保證活性不喪失，并且高效率提取和純化胰島素樣生長因子(IGF-1)，現有技術報道了如下方法：

中國專利200410053399.6，報道了一種從鮮鹿茸中提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的方法，包括切片、低溫勻漿、超聲波處理、高速離心分離、超濾、冷凍干燥等步驟。由于采用的提取溶劑為去離子水，對胰島素樣生長因子(IGF-1)的提取率很低，不適合工業化生產。

中國專利申請200510015619.0，報道了一種利用pH9～12的碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液、碳酸氫鈉-氫氧化鈉緩沖液或稀氨水與稀酸配制而成的堿性溶液為提取劑，通過超聲波強化浸提、超濾濃縮、去脂、酸解、離子交換層析、第二次超濾和冷凍干燥等步驟提取鮮鹿茸中的IGF-1等活性多肽的方法。據報道，提取一步中IGF-1的提取率可以達到3200～3500ngIGF-1/g鮮鹿茸，而采用去離子水作提取劑，在相同工藝條件下IGF-1的提取率僅為1000ngIGF-1/g鮮鹿茸以下。相比較而言，該方法提取率有了很大提高，但是依然有待進一步提高。此外提取液還需經過去脂、酸解、離子交換層析、第二次超濾和冷凍干燥等繁瑣生物步驟才能得到最終的凍干粉，所得到的凍干粉中IGF-1的含量只達到400-1000ppm。

中國專利申請200510015620.3，公開了一種綜合提取鮮鹿茸中活性成分的方法，首先利用超臨界CO₂萃取鮮鹿茸中脂溶性成分，萃取條件是：萃取溫度25～35℃，萃取壓力20～60MPa，CO₂流速10～25kg/h；然后采用超聲波強化浸提、超濾濃縮和冷凍干燥技術提取超臨界CO₂萃余物中的胰島素樣生長因子IGF-1等活性多肽。該方法采用超臨界CO₂萃取技術，為提取IGF-1等活性多肽進行了脫脂預處理，但是提取IGF-1時依舊采用和中國專利申請200510015619.0相同的pH9～12的碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液進行提取，離心分離后的提取率依然保持3200～3500ng?IGF-1/g鮮鹿茸的水平。此外，提取后的提取液，只是直接進行了簡單的后處理，即超濾濃縮、凍干，沒有經過離子交換層析柱，得到的凍干粉中IGF-1的含量顯然低于中國專利申請200510015619.0的400-1000ppm。

現有技術中已報道的方法，提取率還可以再提高，且純度不高，僅可作為化妝品和保健品的原料，不能滿足藥用的要求(純度大于98％)。

發明內容

本發明的目的在于提供一種從鹿茸提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的新方法，可以克服現有技術的不足，提供更高的提取率，并且最終產物凍干粉具有更高的純度。

本發明的方法包含如下步驟：

1、粉碎：取鮮鹿茸，在低溫下粉碎，溫度4-10℃，過80目篩。

2、超聲波提取：將粉碎后的鹿茸用3-10倍(體積/重量)的pH9-12(優選pH10)的緩沖液進行提取，優選5-9倍，最優選7倍；溫度4-30℃，(優選10-25℃，最優選20℃)；時間10-60min，優選15-30min，最優選15-20min；提取1-2次。

3、高速離心分離：提取液于高速離心機中5000-10000轉離心20min，沉淀部分加入2-5倍的緩沖液，重復上述操作，合并兩次離心所得上清液。

4、超濾：將上清液用膜進行超濾，去除小分子物質和大分子物質，并對上清液進行濃縮，得濃縮液，膜的截留值為1-100kDa，優選6-20kDa。