[發明專利]一種從水華藍藻中制備脫鎂葉綠酸A甲酯的方法

無效

• 申請號: 200810084616.6
• 申請日: 2008-03-13
• 公開（公告）號: CN101531663A
• 公開（公告）日: 2009-09-16
• 發明（設計）人: 方薇;方起程;劉曄
• 申請（專利權）人: 北京科萊博醫藥開發有限責任公司
• 主分類號: C07D487/22
• 分類號: C07D487/22
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 李華英

1.一種制備脫鎂葉綠酸A甲酯的方法，其特征在于使用水華藍藻作為原料，所述方法包括以下四個步驟：(i)將水華藍藻進行組織破壞，(ii)用有機溶劑提取，(iii)將上述步驟中得到的有機溶劑提取物甲酯化，得到粗品，以及(iv)純化。

2.根據權利要求1的方法，其中所述水華藍藻為太湖藍藻。

3.根據權利要求1或2的方法，其中所述組織破壞步驟為機械破碎法或冷凍破碎法，其中所述機械破碎方法例如用對藍藻進行剪短磨碎；冷凍破碎法是在藍藻中加入低溫液體，攪拌破壞細胞和組織。

4.根據權利要求3的方法，其中所述低溫液體選自能夠達到-50℃至-120℃的低溫液體，優選液氮、液氮與有機溶劑形成的低溫溶劑或干冰與有機溶劑形成的低溫溶劑，其中所述有機溶劑選自C3-C6酮、C1-C4低級烷基醇和C4-C6醚，優選丙酮、甲醇、乙醇和乙醚，更優選丙酮。

5.根據權利要求1-4任一項的方法，其中所述有機溶劑提取步驟是在經組織破碎后的樣品中加入有機溶劑，通過浸泡或回流方式進行一次或多次提取，其中提取時采用的有機溶劑選自C3-C6酮、C4-C6醚、C1-C4低級烷基醇、C1-C2鹵代烷烴、以及上述溶劑與水或C5-C8烷烴的混合溶劑，其中優選丙酮、乙醇、乙醚、二氯甲烷、75％-95％的上述有機溶劑與水的混合溶液，含有5％-25％石油醚或正己烷的上述有機溶劑的混合溶劑，更優選丙酮。

6.根據權利要求1-5任一項的方法，其中所述甲酯化步驟是將用有機溶劑提取得到的提取液濃縮至干后，加入甲醇，在酸存在下反應，反應完畢后，用有機溶劑和水或堿水萃取，分離有機相，干燥，濃縮得到脫鎂葉綠酸A甲酯粗品。

7.根據權利要求6的方法，其中所述酸選自無機強酸，如：濃硫酸、氯化氫等；或有機酸，如甲磺酸、對甲苯磺酸等，優選硫酸；所述萃取時采用的有機溶劑選自C1-C2鹵代烷烴、C4-C6醚、C3-C6酯，優選二氯甲烷、叔丁基甲基醚、乙酸乙酯，更優選二氯甲烷；所述堿水優選碳酸氫鈉水溶液，稀氫氧化鈉水溶液。

8.根據權利要求1-7任一項的方法，其中所述純化步驟是將在甲酯化反應之后濃縮得到的粗品用有機溶劑溶解，加入石油醚或C5-C8烷烴產生沉淀，用石油醚或C5-C8烷烴洗滌至接近無色，干燥，得到脫鎂葉綠酸A甲酯。

9.根據權利要求8的方法，其中所述溶解粗品采用的有機溶劑選自C6-C8芳香烴和C1-C2鹵代烴，優選二氯甲烷、甲苯和苯，更優選二氯甲烷；所述C5-C8烷烴優選正己烷。

10.根據權利要求1的方法，包括以下步驟：

步驟1，將太湖藍藻置于1-8倍重量的丙酮中，攪拌下加入液氮，直至冷凍固化；

步驟2，在得到的固體漿狀溶液中加入1-8倍重量的丙酮，回流或浸泡提取1次或多次，合并提取后的丙酮溶液；

步驟3，將得到的丙酮溶液濃縮至干，加入含有2-10％的硫酸的甲醇溶液，反應至完全，傾入水中，用二氯甲烷萃取，將有機相濃縮、干燥，得到脫鎂葉綠酸A甲酯粗品；

步驟4，將得到的粗品用二氯甲烷溶解，加入石油醚或正己烷至沉淀完全，過濾，將得到的固體用石油醚或正己烷洗滌至基本無色，干燥，得到脫鎂葉綠酸A甲酯純品。