[發明專利]利用單核苷酸多態性分析輔助確定中國漢族患者華發林使用劑量的方法和生物芯片

無效

• 申請號: 200810084249.X
• 申請日: 2008-03-27
• 公開（公告）號: CN101545005A
• 公開（公告）日: 2009-09-30
• 發明（設計）人: 王廷亮;李紅蕾;吳汪黔生;戴書文
• 申請（專利權）人: 李文正納米研究院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 程 淼;劉 玥

技術領域

[0001]本發明涉及中國漢族患者華發林使用劑量的輔助確定方法。更具體地說，本發明涉及在與華發林代謝動力學及藥效學相關的3個基因(VKORC1，CYP2C9和EPHX1)上的4個單核苷酸多態性位點，以及這些單核苷酸多態性位點在預測藥物華發林于中國漢族人種中不同個體之安全使用劑量方面的應用。

背景技術

[0002]華發林(Warfarin，也稱為“華法林”)是臨床上最常用的香豆素類口服型強抗凝藥物，廣泛用于心臟瓣膜置換、房顫、肺栓塞、再次腦卒中(中風)等深度動靜脈血栓性疾病的預防和治療。該藥物的化學結構為3-(a-苯基丙酮)-4-羥基香豆素，為兩種光學同分異構體R型和S型的消旋體(racemic)混合物，其中S異構體的抗凝作用比R異構體更強3～5倍(參見Rettie?AE，Korzekwa?KR，Kunze?KL，Lawrence?RF，EddyAC，Aoyama?T，Gelboin?HV，Gonzalez?FJ，Trager?WF.Hydroxylation?ofwarfarin?by?human?cDNA-expressed?cytochrome?P-450：a?role?for?P4502C9in?the?etiology?of?S-warfarin-drug?interactions.Chem?Res?Toxicol?1992；5：54-59)。由于治療窗窄、個體使用劑量差異較大及可能存在出血等嚴重的并發癥，使得該藥物的使用受到一定的限制。目前華發林安全使用劑量的調整主要依靠監測凝血時間(Prothrombin?time，PT)和國際標準化比值(International?normalized?ratio，INR)。盡管口服華發林的病人每天都嚴密的監測凝血狀況，但在治療的開始階段，仍然約有7.6～16.5％的患者發生抗凝過度導致的出血并發癥或抗凝不足引致的血栓栓塞事件(參見Aithal?GP，Day?CP，Kesteven?PJ，Daly?AK.Association?ofpolymorphisms?in?the?cytochrome?P450?CYP2C9?with?warfarin?doserequirements?and?risk?of?bleeding?complications.Lancet?1999；353：717-719)。

[0003]華發林通過抑制肝臟環氧化還原酶，使無活性的氧化型(環氧化物型)維生素K無法還原為有活性的還原型(氫醌型)維生素K，阻止維生素K的循環應用，干擾維生素K依賴性凝血因子II、VII、IX、X的羧化，使這些凝血因子無法活化，僅停留在前體階段(有抗原，無活性)，而達到抗凝的目的。華發林通過抑制凝血因子的活化抑制新的血栓形成，限制血栓的擴大和延展，抑制在血栓的基礎上形成新的血栓，抑制血栓脫落和栓塞的發生，有利于已經形成血栓的清除。

[0004]華發林的劑量反應關系變異很大，不但年齡、體重及性別等會部分影響不同患者之安全使用劑量，一些環境因素如藥物、食物和疾病狀態都可以影響華發林的藥代動力學。此外，許多遺傳因素包括負責華發林S異構體氧化代謝的肝臟微粒體酶細胞色素P4502C9、維生素K環氧化還原循環系統中的維生素K環氧化還原酶以及含有維生素K環氧化結合位點的微粒體環氧化物水解酶等多種酶活性的變化都會影響藥物華發林的安全使用劑量。

[0005]細胞色素P450?2C9基因(Cytochrome?P450?2C9，CYP2C9)位于人類第10號染色體的q24.1-24.3區，全長50,707bp，含有8個外顯子。該基因具有顯著的臨床實用價值，它可以羥化大約16％目前臨床使用的藥物。相關研究顯示，華發林S異構體在肝臟中的降解代謝主要就是通過CYP2C9基因所編碼的酶(參見Kaminsky?LS，Zhang?ZY.HumanP450?metabolisms?of?warfarin.Pharmacol?Ther?1997；73：67-74)。由于CYP2C9酶活性的狹窄化，使得一些藥物之安全使用劑量很難評估。尤其是類似于華發林之相關治療窗狹窄的藥物。