[發明專利]CA27.29、TPS、CYFRA21－1乳腺癌膠體金三聯檢診斷試劑盒及其制備方法

有效

• 申請號: 200810081852.2
• 申請日: 2008-05-08
• 公開（公告）號: CN101281198A
• 公開（公告）日: 2008-10-08
• 發明（設計）人: 金鑫;戴路
• 申請（專利權）人: 黑龍江美康匯融生物技術股份有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/574;G01N33/558;G01N33/544
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 孫皓晨;費碧華

技術領域

本發明涉及一種診斷腫瘤的試劑盒，尤其涉及一種乳腺癌膠體金三聯檢診斷試劑盒，本發明還涉及該試劑盒的制備方法以及該試劑盒在診斷乳腺癌中的應用，屬于生物醫學領域。

背景技術

乳腺癌是世界上最常見的上皮細胞腫瘤，對人類的健康和生存構成重大威脅，是世界各國面臨的最重要的社會問題之一。時至今日，乳腺癌占全身惡性腫瘤的7％-10％，其發病率呈逐年上升趨勢，自1980年以來每年以3％的速度增長，特別是北美、西歐等發達國家，表現的尤為明顯。全世界每年約有120萬婦女發生乳腺癌，其中，有50萬婦女死于乳腺癌。2006美國癌癥協會，國際癌癥學會和國際乳腺癌聯合體有關乳腺癌的統計資料顯示：在女性人口中，每8位就有1位將遭受乳腺癌的威脅。平均每2分半鐘就有1位女性被診斷為乳腺癌患者。在2006年，平均每13分鐘就有1位女性死于乳腺癌。僅在2006年，有212,920位女性受到乳腺癌的侵襲，大約有40,970位患者將面臨死亡。

在目前乳癌發病機理不清楚的情況下，最好辦法就是早期發現、早期診斷與早期治療，這是提高乳腺癌療效的關鍵。

腫瘤標志物是由腫瘤組織和細胞產生的異常表達的生物活性物質，根據其生化或免疫特性可以識別或診斷腫瘤。多數乳腺癌患者血清中都會出現針對某些腫瘤標志物的抗體，且與疾病的相關性已得到認可，所以腫瘤標志物檢查對乳腺癌的診斷和療效評價方面都具有重要的意義。

CA27.29是一種與腫瘤相關的粘蛋白抗原，其分子是O-連接的低聚糖蛋白，分子量很大。目前，已知由人類MUC-1基因編碼的與乳腺癌相關的抗原分別有MAM6、乳汁粘蛋白、CA27.29和CA15-3。用這些抗原制備的單克隆抗體，能夠不同程度地定量檢查患II期或III期乳腺癌婦女的癌癥復發情況。據有關資料報道，腫瘤相關抗原CA27.29對預測II期或III期乳腺癌病人復發情況具有較高的特異性(達99％)和準確率(88％)。美國食品和藥品管理局(FDA)近期已批準使用RIA?CA27.29。臨床上，通常用40U/ml(RIA)作為正常值的上限。對乳腺癌和卵巢癌轉移的病人，特別是經治療后臨床上無疾病癥狀的病人，在定期進行血清CA27.29檢查時發現，測定值大于40U/ml的病人比測定值小于40U/ml或等于40U/ml的病人，其存活率要低得多。

組織多肽特異抗原(TPS)是細胞角蛋白片段18上的M3抗原決定簇，血清中組織多肽特異抗原含量的高低是衡量腫瘤細胞分裂和增殖活性的一個較為特異的指標。研究表明，組織多肽特異抗原在腫瘤的早期診斷、預測復發和轉移、評價預后方面有獨特的價值。與傳統的腫瘤標志物如甲胎蛋白、癌胚抗原等不同的是，組織多肽特異抗原是“腫瘤活性依賴型”的，它在血清中含量的高低與正在分裂、增殖的腫瘤細胞的數目有關，即與腫瘤的活性有關；而甲胎蛋白、癌胚抗原等則是“腫瘤容量依賴型”的，與腫瘤的瘤體負荷即腫瘤細胞的數目有關。因此，在腫瘤的早期，在出現肉眼復發或轉移之前，由于腫瘤細胞數目較少，那些反映腫瘤容量的標志物的血清水平往往是很低的，而此時腫瘤細胞分裂、增殖活躍，因而組織多肽特異抗原含量可以很高，從而有利于早期發現、早期診斷和防治。

CYFRA21-1是細胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokeratin?19?fragmentantigen?21-1)的英文縮寫，1992年BODENMULER等采用雜交瘤技術制備出BM19.21和KS19.1兩株單克隆抗體，經配對組成免疫測定方法，可特異性的識別細胞角蛋白19的片段抗原。在正常情況下細胞角蛋白19在外周血、骨髓、淋巴結中無表達或低表達，而在惡性上皮癌中，激活的蛋白酶加速了細胞的降解，使得大量可溶性的CYFRA21-1被釋放，造成血液中CYFRA21-1濃度升高。CYFRA21-1作為一種新的上皮來源性質的腫瘤標志物，近幾年來在腫瘤臨床的應用越來越廣泛，在許多上皮性癌如肺癌、鼻咽癌等都有不同程度的檢出率；文獻報道乳腺癌患者血清CYFRA21-1水平與臨床分期有關，但其陽性率不高，僅為21.2％，但與良性腫瘤組差異有顯著性，CYFRA21-1陽性率隨臨床分期及有無轉移或復發的程度增加而上升。由于相關上皮起源的腫瘤都可能表達CK19，因此CYFRA21-1的檢測亦可出現假陽性，這需要結合臨床資料及通過追蹤觀察加以排除。

單獨檢測上述某一腫瘤標志物指標，并不能提供更多的信息，檢測靈敏度和特異性都比較低，很難檢測出早期或復發乳腺癌患者，容易出現誤診或漏診。

發明內容