[發明專利]農作物甲基化差異DNA標記連鎖圖譜的構建方法及其應用

有效

• 申請號: 200810079374.1
• 申請日: 2008-09-10
• 公開（公告）號: CN101353703A
• 公開（公告）日: 2009-01-28
• 發明（設計）人: 孫毅;段永紅;梁小紅;錢錦;儀治本;閆敏
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C40B50/06
• 代理公司: 太原市科瑞達專利代理有限公司
• 代理人: 劉寶賢

1.一種農作物甲基化差異DNA標記連鎖圖譜的構建方法，其特征是首先采用限制性內切酶--PCR擴增方法獲得甲基化差異片斷，然后根據甲基化差異片段在雜交親本之間的異同及其在雜交、回交后代群體中的分離狀況，確定這些片段之間以及目標性狀與這些分離片段之間的連鎖強度；尋找與目標性狀緊密連鎖的甲基化差異DNA分子標記，從而構建該時期甲基化敏感的分子標記連鎖圖譜。

2.如權利要求1所述的農作物甲基化差異DNA標記連鎖圖譜的構建方法，其特征是將DNA基因組完全消化，從而得到完全消化的DNA甲基化差異片段，用于構建DNA甲基化的分子標記連鎖圖譜。

3.如權利要求1或2所述的農作物甲基化差異DNA標記連鎖圖譜的構建方法，其特征是在限制性內切酶反應中，酶切和連接可同時進行，或者分別進行。

4.如權利要求1或2所述的農作物甲基化差異DNA標記連鎖圖譜的構建方法，其特征是PCR擴增方法，可采用預擴增和選擇性擴增兩步完成，或者一步擴增完成。