[發(fā)明專(zhuān)利]一種高溫酒精發(fā)酵方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810073910.7
• 申請(qǐng)日: 2008-11-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101407828A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-04-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梁靜娟;龐宗文;覃曉娟;馮家勛
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 廣西大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12P7/06
• 分類(lèi)號(hào): C12P7/06;C12N1/16;C12R1/865
• 代理公司: 廣西南寧公平專(zhuān)利事務(wù)所有限責(zé)任公司
• 代理人: 黃永校

1、一種高溫酒精發(fā)酵方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：

(1)制備高溫酒精酵母種子液

將從自然界土壤樣品中篩選所獲得的高溫酒精酵母斜面保藏種接種于高溫酒精酵母種子液中，于35-37℃、pH?3.0-7.0下培養(yǎng)24-48小時(shí)，制備得高溫酒精酵母種子液，

(2)接種到高溫酒精酵母發(fā)酵液中

將(1)制備得的高溫酒精酵母種子液按10-30％(v/v)的接種量接入高溫酒精酵母發(fā)酵液中，于37-44℃、pH?3.0-7.0下發(fā)酵48-72小時(shí)。

2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的高溫酒精發(fā)酵方法，其特征在于所述高溫酒精酵母的種子液和發(fā)酵液的組成為：

(1)所述高溫酒精酵母種子液的組成(w/v)為：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO₄，

(2)所述高溫酒精酵母發(fā)酵液的組成(w/v)為：10.0-25.0％碳源，0.2％尿素，0.05％MgSO₄，其中的碳源是葡萄糖、蔗糖、甘蔗糖蜜、甘蔗汁、木薯粉水解液、玉米粉水解液的一種。

3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的高溫酒精發(fā)酵方法，其特征在于，所述從自然界土壤樣品中篩選所獲得的高溫酒精酵母通過(guò)以下方法獲得：

(1)篩選

從熱帶、亞熱帶地區(qū)的水果樹(shù)下、甘蔗地、糖廠、溫泉等地方采集土壤樣品，分別放置于高溫酒精酵母種子液中，于pH?3.0、42℃下靜止培養(yǎng)72小時(shí)，選擇有菌生長(zhǎng)的富集培養(yǎng)物于固體平板培養(yǎng)基上進(jìn)行常規(guī)劃線分離純化，固體平板培養(yǎng)基的組成(w/v)：2％葡萄糖、0.5％蛋白胨、0.2％酵母膏、0.05％MgSO₄、瓊脂1.5％，于pH?5.0、42℃下培養(yǎng)，待長(zhǎng)出酵母單菌落，用含0.05％紅四氮唑的固體平板培養(yǎng)基覆蓋于菌落上層，觀察菌落顏色深淺變化，挑選出顏色較深的菌株進(jìn)一步純化，將純化的酵母接種于高溫酒精酵母種子液中，于37℃、轉(zhuǎn)速為160r/min的搖床中培養(yǎng)24小時(shí)，按15％接種量將高溫酒精酵母種子液接入發(fā)酵液中，發(fā)酵液的組成(w/v)：15％葡萄糖、0.5％蛋白胨、0.2％酵母膏、0.05％MgSO₄，于pH?5.0、40℃下靜止發(fā)酵48小時(shí)，測(cè)定發(fā)酵液的酒精含量，選取酒精含量最高的酵母即得高溫酒精酵母。

(2)保藏

將高溫酒精酵母接種于斜面培養(yǎng)基上，斜面培養(yǎng)基的組成(w/v)：2％葡萄糖、0.5％蛋白胨、0.2％酵母膏、0.05％MgSO₄、瓊脂1.5％、pH?5.0，37℃培養(yǎng)48小時(shí)后于4℃冰箱中保存。